二氢杨梅素对生长育肥猪生产性能、肠道屏障和抗氧化功能的影响及机制

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二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DHM)是一种提取自藤茶的天然黄酮类化合物,是藤茶黄酮的主要活性成分。大量研究表明,藤茶黄酮可以促进畜禽生长。目前,DHM在生长育肥猪上的研究较少。本研究以生长育肥猪为研究对象,探究DHM对生长育肥猪生产性能、肠道屏障和抗氧化功能的影响。同时以IPEC-J2细胞为研究对象,考察DHM对IPEC-J2细胞紧密连接蛋白和粘蛋白表达的影响,并探究其调节肠道抗氧化功能的机制。试验一饲粮添加DHM对生长育肥猪生产性能、肠道屏障和抗氧化功能的影响24头平均体重为26.95±0.26 kg的“杜×长×大”阉公猪被随机分为四个组,其中对照组饲喂基础饲粮,处理组分别在基础饲粮中添加0.01%、0.03%和0.05%的DHM,每组6个重复,每个重复1头猪,试验期15周。结果如下:(1)与对照组相比,饲粮添加0.05%DHM显著降低了生长育肥猪65kg~出栏阶段的料重比(F/G)(P<0.05)。(2)与对照组相比,饲粮添加DHM显著增强了生长育肥猪空肠粘膜麦芽糖酶、蔗糖酶和脂肪酶的活性(P<0.05)。(3)与对照组相比,饲粮添加0.01%和0.03%DHM显著增加了生长育肥猪空肠粘膜SGLT1和Pep T1的m RNA表达(P<0.05);此外,饲粮添加0.05%DHM显著降低了SGLT1的m RNA表达(P<0.05)。(4)与对照组相比,饲粮添加DHM对生长育肥猪空肠绒毛高度无显著影响(P>0.05);饲粮添加DHM显著降低了空肠隐窝深度,并显著增加了绒隐比(P<0.05)。(5)与对照组相比,饲粮添加DHM显著上调了生长育肥猪空肠粘膜紧密连接蛋白Occludin和Claudin-1的蛋白表达,并显著降低了血清中DAO的含量(P<0.05)。(6)与对照组相比,饲粮添加0.01%DHM显著增加了生长育肥猪空肠粘膜粘蛋白MUC1和MUC2的m RNA表达(P<0.05);此外,饲粮添加0.03%和0.05%DHM显著降低了MUC2的m RNA表达(P<0.05)。(7)与对照组相比,饲粮添加DHM显著增加了生长育肥猪血清中IL-10、Ig A和Ig M的含量,并降低了IL-1β的含量(P<0.05)。此外,饲粮添加DHM显著增加了空肠粘膜中SIg A和IL-10的含量,同时降低了IL-1β、IL-6、INF-γ和TNF-α的m RNA表达,并下调了TNF-α的蛋白表达(P<0.05)。(8)与对照组相比,饲粮添加DHM对生长育肥猪盲肠和结肠的食糜p H值无显著影响(P>0.05)。(9)与对照组相比,饲粮添加DHM显著降低了生长育肥猪盲肠食糜中总菌和大肠杆菌的丰度(P<0.05),并显著增加了乳酸杆菌的丰度(P<0.05)。此外,饲粮添加DHM显著降低了结肠食糜中大肠杆菌的丰度(P<0.05)。(10)与对照组相比,饲粮添加DHM显著增加了生长育肥猪盲肠食糜中戊酸和丁酸的含量(P<0.05);此外,饲粮添加DHM显著增加了结肠食糜中丁酸的含量(P<0.05)。(11)与对照组相比,饲粮添加DHM显著提高了生长育肥猪空肠粘膜中T-AOC、CAT、T-SOD和GSH-Px的活性,并显著降低了MDA的含量(P<0.05)。此外,饲粮添加DHM显著上调了空肠粘膜NQO1、HO-1、p-ERK和Nuclear Nrf2的蛋白表达(P<0.05)。上述结果表明,饲粮添加DHM可增强生长育肥猪的肠道屏障功能,提高其对营养物质的消化吸收,降低料重比。同时,饲粮添加DHM可增强生长育肥猪机体免疫和肠道抗氧化功能。试验二二氢杨梅素对IPEC-J2细胞紧密连接和粘蛋白表达以及抗氧化功能的影响及机制研究试验使用不同浓度的DHM(0μmol/m L、10μmol/m L、20μmol/m L、40μmol/m L)处理IPEC-J2细胞,考察其对IPEC-J2细胞紧密连接蛋白和粘蛋白表达以及ERK/Nrf2/HO-1信号通路的影响。此外,使用PD98059(ERK抑制剂)和DHM处理IPEC-J2细胞,从信号通路方面探讨DHM调节肠道抗氧化作用的机制。结果发现:(1)与对照组相比,DHM处理显著增加了IPEC-J2细胞紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin和ZO-1以及粘蛋白MUC1和MUC2的m RNA表达(P<0.05)。(2)与对照组相比,DHM处理显著增加了IPEC-J2细胞Nrf2、Mn SOD2、CAT和GR的m RNA表达(P<0.05),并显著上调了p-ERK、Nuclear Nrf2和HO-1的蛋白表达(P<0.05)。(3)PD98059处理IPEC-J2细胞后,p-ERK、Nuclear Nrf2和HO-1的蛋白表达显著降低(P<0.05)。上述结果表明,DHM可增加IPEC-J2细胞紧密连接蛋白和粘蛋白的m RNA表达,并可通过激活ERK/Nrf2/HO-1信号通路增强IPEC-J2细胞的抗氧化能力。综上所述,二氢杨梅素可以降低生长育肥猪的料重比,改善其肠道屏障功能,并可通过激活ERK/Nrf2/HO-1信号通路增强生长育肥猪肠道的抗氧化能力。
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