论文部分内容阅读
作为先天免疫系统的主要效应细胞，NK细胞是人体抵抗癌细胞和病毒感染细胞的第一道防线，因而目前随着肿瘤发病率的急剧上升，对NK细胞的研究已经成为免疫学领域中非常重要的部分，NK细胞过继转移方法已经越来越广泛的应用于临床进行抗肿瘤免疫治疗。然而，由于NK细胞在人体外周血单个核细胞(PBMCs)中仅占5％到15％，因此很难从供者直接得到足量的NK细胞用于疾病的治疗。目前，NK细胞治疗的关键问题主要集中在如何提高NK细胞数量及如何提高NK细胞功能两大方面，为了克服这一难题，很多研究者都在致力于探索各种方法来得到大量且高活性的NK细胞，包括单独或联合使用细胞因子如IL-15和IL-2，或假以各种饲养细胞如K562细胞系，肾母细胞瘤细胞系等来诱导，或从外周血单个核细胞中分离出NK进行体外扩增培养，如剔除CD3阳性细胞或选择CD56阳性的细胞。然而，结果或是扩增倍数不高，或是NK纯度不高，或是扩增倍数可观但是饲养细胞系无法除去等，离临床的要求还有一定的距离。 4-1BBL又被称为CD137L或TNFSF9，是肿瘤坏死因子配体超家族中的成员，能够与T细胞，NK细胞等细胞上的4-1BB受体相互作用，从而激活并扩增这些细胞。白介素-21（IL-21）是一类分泌型的细胞因子，可以与B细胞，T细胞，NK细胞等细胞上的IL-21R相互作用从而介导其扩增、分化和抗肿瘤的生物效应。已有研究者将这两种细胞因子表达在K562细胞系表面，来扩增NK细胞。 本研究采用了一种新的方法来扩增人PBMCs中的NK细胞，即将重组的人类的4-1BBL和IL-21，通过生物素化的手段，同时固定于链霉亲和素标记的磁珠上，然后与正常供者的PBMCs一起共培养，刺激其中的NK细胞，使其扩增并激活。通过三次刺激和三周的培养，我们得到了可观倍数的高纯度的并且具有强杀伤活性的NK细胞。本文是首个使用固相的细胞因子来扩增NK细胞，具有无需引入滋养细胞，不必事先纯化NK细胞，且可将扩增的NK细胞与刺激成分进行有效分离的优势，为NK细胞的扩增和激活提供了新的可行策略，也可能使NK细胞其在临床应用上更加安全有效。