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洋桔梗(Eustoma grandiflorum)是一种深受消费者青睐的切花品种,但是它对生长环境的要求比较苛刻,这大大限制了它的大规模推广,因此,通过提高洋桔梗植株非生物胁迫耐受性和适应性具有重大的市场意义。非生物胁迫导致植物胞内的活性氧(ROS)大量爆发,造成植物细胞结构及酶促系统受到破坏。类胡萝卜素是植物胞内重要的非酶促抗氧化物质,和植物抗氧化能力有很大关系。本研究利用含有本实验室构建并保存的植物双元表达载体pCambia2300-LcCHYB的农杆菌C58将来自中华枸杞(Lycium Chinense Miller)的β-类胡萝卜素羟化酶基因(LcCHYB)转入White品种洋桔梗中并获得转基因株系,并且洋桔梗提高了对非生物胁迫的耐受性。本研究得到以下结果:1经过培养基优化和农杆菌抑制实验,发现洋桔梗不定芽最佳生根激素浓度为0.3mg/L NAA+0.3mg/L IBA,卡纳霉素(Kn)的最佳筛选浓度为70mg/L,农杆菌抑制最低头孢霉素(Cef)浓度为350mg/L。2通过对转基因型和野生型两种洋桔梗进行光合荧光参数进行检测,发现Fv/Fm值、ФPSⅡ值、qP值和NPQ值分别较野生型提高了28%、32%、10%和75%。3利用高效液相色谱对各组类胡萝卜素进行检测,发生总类胡萝卜素、β-类胡萝卜素、叶黄素、玉米黄质和叶黄素循环池含量均发生上调,其中总类胡萝卜素、玉米黄质和叶黄素循环池的相对差值分别为18.51μg/g、6.28μg/g和13.10μg/g,比对照组野生型提高了23.5%、91.1%和75.0%。4对各组的氧化还原酶系(SOD、POD和CAT)及MDA的检测和分析,发现SOD值和POD值均发生显著上调,转基因型上调幅度分别是野生型的4.36倍和1.71倍,CAT和MDA则没有显著差异。因此本研究得出结论,导入并表达外源LcCHYB基因提高了洋桔梗植株抗氧化胁迫的能力,从而达到对细胞的保护,非生物胁迫的耐受性得到了加强。