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本文研究目的：通过观察清热、活血、补肾及其合方对人骨肉瘤细胞Hosp36增殖抑制和EGFR-PLC-γ1-PKCα信号转导通路的影响，研究清热、活血、补肾法及三法联用治疗骨肉瘤的机理，探讨热毒、血瘀及肾虚与骨肉瘤病变和EGFR-PLC-γ1-PKCα信号转导的关系。
研究方法：采用人骨肉瘤细胞Hosp36为实验对象，用清热、活血、补肾及其合方处理细胞，在倒置显微镜下观察Hosp36细胞形态的改变；用MTT法检测对Hosp36细胞生长的影响；用Westernblot检测Hosp36细胞的EGFR、PLC-γ1、PKCα蛋白表达。
研究结果：1.清热、活血、补肾及其合方对Hosp36细胞增殖明显抑制，对细胞形态作用明显不同，清热组细胞表面逐渐粗糙，继而胞质内充满多量颗粒状物质，然后出现空泡样变化；活血组细胞皱缩，呈长条形，细胞间隙加大，胞质粗糙；补肾组细胞可见细胞皱缩，透光度减小，形态不规则，细胞间基质呈现丝网状，贴壁性变差；合方组细胞形态与清热组相似，培养基中可见有较多的细胞碎片。2.清热、活血、补肾及其合方均能抑制Hosp36细胞的生长，合方作用最强，随药物浓度的增加，对细胞生长抑制呈现剂量-效应依赖关系。3.人骨肉瘤Hosp36细胞可检测到很高量的EGFR、PLC-γ1、PKCα蛋白分子表达。4.当用IC50药物剂量处理细胞时，清热、活血、补肾及其合方均能抑制EGFR-PLC-γ1-PKCα信号通路各蛋白表达水平，其作用强弱依次为：合方组＞清热组＞活血组＞补肾组。
研究结论：1.清热、活血、补肾组及其合方均能明显抑制人骨肉瘤细胞Hosp36的生长，合方组效果最好，表明清热、活血、补肾三法联用具有协同作用。2.骨肉瘤发病和EGFR-PLC-γ1-PKCα转导通路信号增强密切相关。3.清热、活血、补肾组及其合方能下调Hosp36细胞EGFR-PLC-γ1-PKCα信号通路各蛋白表达水平，表明清热、活血、补肾及三法联用正是通过抑制EGFR-PLC-γ1-PKCα信号转导途径而抑制了骨肉瘤细胞增殖。4.通过药效反证，在骨肉瘤病变中，热毒、血瘀、肾虚与EGFR-PLC-γ1-PKCα信号表达和转导增强密切相关。5.骨肿瘤治疗中应以清热活血祛邪为主，补肾扶正为辅，标本兼顾。