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目的通过对树脂的筛选、吸附与洗脱条件的优化以及脱色、结晶方法的摸索,对从发酵液中分离纯化L-色氨酸的工艺进行系统研究,旨在进一步提高发酵液中L-色氨酸的提取率。方法1.通过静态吸附实验、静态洗脱实验对12种不同类型的树脂进行筛选。2.通过静态吸附实验、动态吸附实验对吸附条件进行优化。3.通过静态洗脱实验、动态洗脱实验对洗脱条件进行优化。4.通过动态脱色实验对6种不同类型的脱色树脂及活性炭进行筛选,并通过静态脱色实验、动态脱色实验对脱色条件进行优化。5.通过正交实验,确定L-色氨酸最佳结晶条件。结果1.在所筛选的12种树脂中,001×7阳离子交换树脂的吸附率、洗脱率均高于其它树脂,故选定其为本实验的目的树脂。2.通过静态吸附实验,考察了温度、pH值和L-色氨酸浓度对001×7阳离子交换树脂平衡吸附量的影响,结果显示,001×7阳离子交换树脂吸附L-色氨酸的吸附量随温度的升高略呈下降的趋势,是个放热过程;pH值对吸附的影响不明显;随着溶液中L-色氨酸浓度的增加吸附量相应增加,但吸附率却有所下降。通过动态吸附实验,选择进料流速1.0ml/min。3.通过静态洗脱实验和动态洗脱实验,选择2.0mol/L的氨水进行洗脱,洗脱流速控制在0.5ml/min。4.在所筛选的7种脱色介质中,D315树脂不仅具有较理想的脱色效果,同时对L-色氨酸的吸附也低,故本实验选择D315树脂作为脱色介质。5.通过静态脱色实验,表明温度升高有利于色素的吸附,pH值应调至4~5;通过动态脱色实验,选择脱色流速1.0ml/min。6.通过正交实验,确定L-色氨酸最佳结晶条件为:L-色氨酸浓度:3.5%;温度:4℃;最终乙醇浓度:10%。7.采用摸索的工艺,对L-色氨酸工程菌发酵液中的L-色氨酸进行了分离纯化,总提取率为73.0%,纯度为98.1%。结论采用001×7阳离子交换树脂吸附L-色氨酸,以浓度为2.0mol/L氨水进行洗脱,收集的流份经D315阴离子交换树脂脱色,浓缩结晶后得L-色氨酸成品。本工艺总提取率为73.0%,纯度可达98.1%。