论文部分内容阅读
硒作为一种生物体必需的微量元素,对某些疾病具有预防及治疗效果。硒虽然具有较为重要的生物学作用,但其生物活性的范围较为狭窄,因此在应用时较易误入硒的毒性范围。硒的浓度过高时具有强毒性,且能够对自然环境造成一定的污染,低浓度硒对生命具有多种健康效应,纳米硒对生物具有更加高效且高安全性的优势。纳米材料在农业领域的应用日益广泛,但是目前普遍使用的物理、化学合成方法存在着费用高、环境生态危害大等问题,因此,利用生物还原法制备纳米材料的新型绿色合成技术已成为纳米材料研究领域的热点之一。本研究首先采用生防菌枯草芽孢杆菌和亚硒酸钠（Na2SeO3）溶液共孵育的方法制备生物源纳米硒;然后采用扫描电镜（SEM）+能量分析光谱仪（EDS）联用的方法对其发酵物进行物理表征测试,验证生防菌枯草芽孢杆菌能够还原亚硒酸钠为单质纳米硒;最后研究生物合成的单质纳米硒对植物病原菌稻瘟菌的菌丝生长、孢子萌发以及活体稻瘟菌接种发病情况的影响。主要研究结果具体如下:（1）本研究通过生防菌枯草芽孢杆菌还原亚硒酸钠（Na2SeO3）,亚硒酸钠浓度为4mM条件下,其还原率为48.69%。采用SEM-EDS联用的方法对其发酵物进行物理表征测试,发现生防菌枯草芽孢杆菌能够还原亚硒酸钠为单质硒,且均为纳米尺寸。其粒径基本分布在50nm-250nm范围内。此外,将发酵产物分别进行室温放置四周处理及湿热灭菌处理后再次进行SEM-EDS联用表征测试,结果发现,纳米硒粒子的尺寸仍然为纳米级,且样品仍然呈现红色。这说明利用生物合成法制备的纳米硒较为稳定,不易发生转变。（2）利用生防菌枯草芽孢杆菌还原亚硒酸钠合成单质纳米硒。研究不同浓度的生物源纳米硒对稻瘟菌菌丝生长和孢子萌发的影响:对照组,0μg/ml;处理组50-250μg/ml,每50μg/ml为一个浓度梯度。数据分析显示生物源纳米硒对稻瘟菌菌丝生长作用毒力回归方程为:y=2.7306+1.5095x;相关系数（r）值为0.9308;EC50为31.8707μg/ml;EC90为225.0985μg/ml。生物源纳米硒对稻瘟菌孢子萌发抑制毒力回归方程为:y=1.2465+1.5290x;相关系数（r）值为0.9244;EC50为285.0339μg/ml;EC90为1963.648μg/ml。此外,进行稻瘟菌活体接种实验,采用五组处理:CK对照组、1.96mg/ml纳米硒处理、生防菌枯草芽孢杆菌喷施处理、1mM亚硒酸钠溶液处理、先进行生防菌处理,3d后亚硒酸钠溶液处理、先亚硒酸钠溶液处理,3d后生防菌处理,研究分析其对稻瘟发病的影响。研究表明,7d后,除对照组稻瘟发病正常以外,其他处理组均未见发病。因此得到初步结论:生物源纳米硒具有一定防控稻瘟病的能力。