西瓜霜(Mirabilitum Pra epa ratum)是葫芦科植物西瓜的成熟果实与芒硝,经过加工而制成的白色结晶粉末,具有清热泻火及消肿止痛的功效,主治喉痹、咽喉肿痛和口舌生疮。一直以来西瓜霜用于治疗口疮是因为西瓜和芒硝均有清热泻火的作用,两药合用能够增加疗效。但是由于传统的西瓜霜炮制时间较长,现代众多的研究和加工者完全违背了古人炮制西瓜霜的意图,为简化西瓜霜的炮制过程,以西瓜汁为溶液对硫酸钠进行溶解、过滤、浓缩、析晶的方法制取西瓜霜。在课题组创新性的提出西瓜霜实质是发酵的炮制方法和前期研究基础上,本文对发酵法制得的西瓜霜的提取工艺、提取物的药理作用进行了研究,并用西瓜霜提取物制备出外用的凝胶剂,同时对西瓜霜凝胶及提取物进行了以含量测定为主的质量标准研究。1.提取工艺研究:通过正交设计实验,以西瓜霜化学成分分离得到的含量相对较多并且有抗菌活性的(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-失咔啉-3-羧酸的总含量作为指标,对西瓜霜的提取工艺进行优选,并进行工艺验证。确定最佳提取工艺为:10倍量的75%乙醇加热回流提取2次,每次1 h。2.药理作用研究:使用苯酚烧灼大鼠口腔内颊膜,造成口腔溃疡模型,评价西瓜霜、西瓜霜提取物以及硫酸钠对口腔溃疡的愈合作用,结果表明西瓜霜提取物和西瓜霜对口腔溃疡愈合具有促进作用,能够缩短愈合时间,硫酸钠对口腔溃疡没有愈合作用;进行小鼠耳廓肿胀和大鼠足趾肿胀实验,评价西瓜霜提取物的抗炎作用,结果表明西瓜霜提取物能够降低小鼠耳廓肿胀度和大鼠足趾肿胀度,与空白组比较具有显著的抗炎作用;进行小鼠醋酸扭体反应和热板法实验,评价西瓜霜提取物的镇痛作用,结果表明西瓜霜提取物能够有效减少醋酸致小鼠的扭体反应次数,降低小鼠热板阈值,与空白组比较具有显著的镇痛作用。3.成型工艺研究:以凝胶剂的外观、成型性、涂展性为评价指标,筛选凝胶基质;以药物与基质的相容性、成型性、稳定性为评价标准,对加药方法与顺序进行考察;以凝胶的成形性和稳定性为评价指标,考察甘油用量。最后确定剂型制备工艺为:10 g西瓜霜提取物药粉加入适量水中溶解,加入1.5 g卡波姆934P,静置过夜,使卡波姆完全溶胀。另取0.1 g尼泊金乙酯,溶于少量乙醇,加入5 g甘油,混合之后挥干乙醇,加入至溶胀好的加药凝胶基质中,混合均匀,加入3 g三乙醇胺使凝胶剂pH值为6-7左右,加水至100 g,即制得西瓜霜凝胶剂。4.质量标准研究:根据《中国药典》2015年版四部通则中水分测定法,测定西瓜霜提取物中的水分含量;通过炽灼残渣法测定提取物中的硫酸钠含量;采用高效液相色谱法测定西瓜霜提取物中的(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸的含量,色谱柱为Dikma Diamonsil C18(5μ,250×4.6 mm),流动相为乙腈-水(10:90),检测波长为220 nm,流速为0.8 mL/min,结果表明(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸的浓度在3.13～50.0μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,提取物中(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸的含量为0.309 mg/g;通过高效液相色谱法,对西瓜霜凝胶剂中的(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸的含量进行测定,色谱柱为Dikma Diamonsil C18(5 μ,250×4.6 mm),流动相为乙腈-水(10:90),检测波长为220 nm,流速为0.8 mL/min,结果表明(1S,33)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸的进样量在0.10-0.50μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,西瓜霜凝胶剂中(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-ββ-咔啉-3-羧酸的含量为0.028 mg/g。通过本文的研究,确定了西瓜霜的最佳提取工艺,确认了西瓜霜提取物对口腔溃疡有治疗作用,同时具有抗炎和镇痛的作用,并且制备出了能够外用的西瓜霜提取物凝胶剂,完善了西瓜霜提取物和凝胶剂的质量标准,为西瓜霜新药的成功开发奠定了较好的基础。