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目的:分别应用肿瘤细胞裂解物(tumor cell lysates,TCL)、细小病毒感染的肿瘤细胞裂解物(parvovirus infected-tumor cell lysates,PV-TCL)负载树突状细胞(dendritic cells,DCs),根据DCs抗原负载不同分为未负载DCs组、TCL-DCs组、PV-TCL-DCs组,通过检测不同组DCs的表面表型、程序性死亡配体-1(Programmed death ligand 1,PD-L1)的表达及其促进T细胞增殖、分泌干扰素-γ(interferon,IFN-γ)、白细胞介素-2(interleukin,IL-2)的能力,对比分析不同抗原负载DCs对T细胞增殖的影响,为DCs免疫治疗的临床应用提供参考。方法:通过分离肿瘤患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)诱导DCs形成,应用光学显微镜观察DCs的细胞形态。将人肺腺癌A549细胞反复冻融5次获得TCL,PV感染人肺腺癌A549细胞后进行5次冻融获得PV感染的TCL(PV-TCL),分别应用TCL、PV-TCL负载DCs,根据DCs抗原负载不同分为未负载DCs组,TCL-DCs组,PVTCL-DCs组,应用流式细胞仪测定不同组DCs的表型、PD-L1的表达。将自体T细胞与不同组DC s共培养,测定T细胞的增殖及分泌IFN-γ和IL-2的能力。结果:(1)光学显微镜下观察来自肿瘤患者PBMCs诱导生成的DCs。其细胞膜表面有许多树突状突起,这是DCs的典型形态特征。流式细胞仪检测DCs表面表达高水平的HLA-DR,中等水平的CD1a、CD80和CD86表达,以及低水平的CD83、CD14表达。(2)流式细胞仪检测3组DCs的表面标志。与TCL-DCs组及未负载DCs组比较,PV-TCL-DCs组的CD80(P=0.000)、CD83(P=0.000)和CD86(P=0.000)这些代表DCs成熟程度的标志物明显增加,这表明PV-TCL-DCs比TCL-DCs及未负载的DCs更成熟。(3)流式细胞仪检测3组DCs的PD-L1表达。PV-TCL-DCs与TCLDCs组(P=0.002)及未负载DCs组(P=0.000)相比,PD-L1表达增加,进一步证实PV-TCL-DCs比TCL-DCs更成熟。(4)3组DCs分别与自体T细胞共培养后,与单独的T细胞相比,PV-TCL-DCs能促进自体T细胞增殖。(5)3组DCs分别与自体T细胞共培养后,与TCL-DCs组及未负载DCs组比较,PV-TCL-DCs组显著促进CD4+和CD8+T细胞分泌IFN-γ及IL-2(均为P=0.000)。T细胞分泌IFN-γ及IL-2的增加表明PV-TCLDCs可以更有效激活CD4+和CD8+T细胞。结论:(1)PV感染的TCL负载DCs可增加CD80、CD83和CD86的表达,促进DCs的成熟。(2)PV感染的TCL负载DCs表达较高水平的PD-L1。(3)PV感染的TCL负载DCs与自体T细胞培养后促进T细胞增殖及分泌IFN-γ、IL-2。