副猪嗜血杆菌是一种前期主要引起浆液性纤维素性胸膜炎,后期主要引起关节炎,在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和圆环2型病毒(PCV-2)等免疫抑制性疾病感染的情况下危害较大的细菌。主要影响2-16周龄的猪,特别是5-8周龄的保育猪,发病率在10%-15%,死亡率可达50%左右。从长沙某猪场送来的患多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎的病料在巧克力培养基上进行病料涂板,37℃恒温培养,分离到可疑菌后。采用革兰氏染色镜检、卫星生长现象、生化鉴定初步鉴定为副猪嗜血杆菌,取2株可疑菌通过序列比对,发现其与GenBank中的副猪嗜血杆菌同源性在98%～99%。通过NAD浓度影响副猪嗜血杆菌生长的这一关键性因素以及副猪嗜血杆菌对培养温度的需求与生长周期的探索,配制出4种浓度为0.5g/L、1.0g/L、2.0g/L、4.0g/L的NAD,按照每1000m1培养基中加入10ml NAD的标准,制作出TSA固体培养基和TSB液体培养基,将4种不同TSA固体培养基分别于35℃、36℃、37℃、38℃进行副猪嗜血杆菌的培养,测定出最佳培养浓度和温度,以及有氧和无氧环境的对比。表明副猪嗜血杆菌在4种不同TSA固体培养基中,NAD浓度大于2.0g/L,培养温度在37℃-38℃生长周期最短,并且在有氧环境中的生长速度略快于无氧环境,在4种不同的TSB液体培养基中37℃恒温培养时,发现其生长速度和菌液终浓度基本相同。取1株副猪嗜血杆菌进行药敏实验。结果表明,副猪嗜血杆菌对头孢噻肟敏感性最强,对林可霉素、青霉素、恩诺沙星和氟苯尼考4种药物的敏感性较强,对氨苄西林、新霉素和强力霉素3种药物的敏感性中等,对复方新诺明敏感性较弱。为长沙地区副猪嗜血杆菌的预防和治疗方面提供了借鉴。