聚乳酸/纳米羟基磷灰石复合支架材料的制备与研究

来源 :华北理工大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:wyitzl
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目的采用冷冻干燥法制备聚乳酸/纳米羟基磷灰石(Polylactic acid/nanoHydroxyapatite,PLA/n HA)多孔支架材料,对其表面形貌、孔隙率、抗压强度及细胞毒性进行检测,为组织工程的研究提供实验依据。方法实验1真空冷冻干燥法制备PLA多孔支架材料。将0.5g PLA充分干燥24h后溶于4ml有机溶剂(1,4-二氧六环/二氯甲烷,v/v)中,根据有机溶剂体积比(1,4-二氧六环/二氯甲烷,v/v)分为3组(n=5):A组:95/5;B组:90/10;C组:85/15。真空冷冻干燥箱内干燥24h后得到PLA多孔支架材料。采用电子扫描显微镜对其表面形貌进行观察,采用体积法对其进行孔隙率检测,采用万能试验机检测其抗压强度以及采用MTT法对其细胞毒性进行检测。所有数据采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析,统计检验的水准设为P<0.05有统计学差异实验2按照实验1中制备的综合数值最佳的C组PLA支架材料中有机溶液的体积比,将PLA与n HA按比例与有机溶剂(1,4-二氧六环/二氯甲烷,v/v)混合,采用真空冷冻干燥技术制备含有n HA的PLA/n HA复合多孔支架材料。根据n HA的含量分为4组(n=5):A组:5%n HA;B组:10%n HA;C组:15%n HA;D组:20%n HA。采用电子扫描显微镜对其表面形貌进行观察,采用体积法对其孔隙率进行检测,采用万能试验机检测其抗压强度以及采用MTT法对其细胞毒性进行检测。所有数据采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析,统计检验的水准设为P<0.05有统计学差异。结果1采用真空冷冻干燥技术制备出的PLA多孔支架材料在扫描电镜下显示出具有大小不一的孔隙结构,孔径大小在10μm200μm之间,孔隙连通性良好。A组试件在扫描电镜下显示出,孔主要为长圆形和圆形结构,孔径大小不一,孔隙较密,但存在封闭的孔隙;B组试件在扫描电镜下显示出,孔主要为椭圆形;C组试件在扫描电镜下显示出大孔的孔壁上面存在较多的小孔,孔壁粗糙。孔隙率检测结果显示,采用冷冻干燥法制备出的PLA多孔支架材料的孔隙率在(68.97±0.12)%73.75±0.48%之间,各组之间两两比较差异有统计学意义(Ρ<0.05)。抗压缩强度测试结果显示,PLA多孔支架材料的平均抗压缩强度在(2.90±0.53)MPa4.11±0.05MPa之间,各组之间两两比较差异有统计学意义(Ρ<0.05)。细胞毒性检测显示,在1、3、5天的观察期间内,阴性对照组与实验组细胞增殖良好,阳性对照组细胞几乎不增长。阴性对照组与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),阴性对照组与实验组比较差异无统计学意义(P>0.05),表明支架材料未对细胞增殖显示出任何毒性,符合体外细胞毒性实验的要求。2采用冷冻干燥法所制备出来的PLA/n HA复合支架材料,在扫描电镜下可以看出加入n HA所制备的PLA/n HA支架材料具有与纯PLA支架相似的孔隙结构,结构均匀,孔连通性良好。然而,n HA的加入使得支架材料中微孔数量有所减少,随着n HA含量的增加甚至有些大孔也会减少,这可能是由于n HA含量较多导致的团聚占据了支架材料的一部分空间造成的。孔隙率检测结果显示,复合支架的孔隙率在(64.30±0.65)%71.34±0.34%之间,各组之间两两比较差异有统计学意义(Ρ<0.05),随着n HA含量的增加孔隙率有降低的趋势。抗压缩强度结果显示,PLA/n HA复合支架材料的平均抗缩压强度在(3.20±0.09)MPa4.29±0.08MPa之间,各组之间两两比较差异有统计学意义(Ρ<0.05),达到松质骨抗压强度的要求;细胞毒性检测显示,在1、3、5天的观察期间内,实验组细胞增殖良好,阳性对照组细胞几乎不增长,实验组与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。表明支架材料未对细胞增殖显示出毒性,符合体外细胞毒性实验的要求。结论1实验条件下,通过冷冻干燥法制备出的PLA支架材料内部具有相互连通的孔隙结构,抗压强度在松质骨抗压强度范围,细胞毒性检测结果显示良好的细胞相容性。2实验条件下,采用真空冷冻干燥法制备出的PLA/n HA复合支架材料内部均有大小不一的孔隙,孔隙之间连通性良好。随着n HA含量的增加PLA/n HA复合支架材料抗压强度出现先增加后减小的趋势,其抗压强度在n HA含量为15%时强度最大,在松质骨抗压强度范围之内。细胞毒性检测结果显示PLA/n HA复合支架材料无毒性。图14幅;表8个;参146篇。
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