本文通过REMI插入突变技术，以Trichoderma atrovirideT23为出发菌，获得了18个转化子，并经过继代培养、PCR扩增和Southern blot，证明线性pV2质粒DNA己成功插入木霉菌基因组，利用优化的木霉菌分子改良技术体系，为今后克隆抑草素相关基因奠定了重要基础。从REMI创制的109个木霉菌突变株中，筛选出了8株有抑草活性转化子(TaA2,TaB3,TaB7,TaE2,TaE8,TaH8,TaJ6和TaJ9)，其发酵液具有抑制稗草的活性，并对水稻生长安全。在进一步筛选抑草活性稳定的转化子的试验中，经过对发酵产物细分为分生孢子、超声波PBS法破碎孢子和发酵液(去除孢子)，分别对稗草生长的生物活性测试，由此获得的转化子TaB3为抑制作用最稳定最明显。 分析目标菌株TaB3鉴定转化子分泌抑草素活性组分，为创制新型生物除草剂奠定基础。本研究开展萃取试验，将萃取液和萃取余液分别进行了稗草根部生长的抑制活性测试。研究表明：氯仿相对稗草根部生长没有表现出抑制作用，而在萃取余液对稗草根生长的活性测试中，表现出一定的抑制作用，抑制率为22.04％。乙酸乙酯作为萃取剂的试验中，出现了类似的结果，即乙酸乙酯相对稗草根部生长没有表现出抑制作用，而在萃取余液对稗草根生长的活性测试中，表现出一定的抑制作用，抑制率为10.51％。经过高效液相色谱(HPLC)分析，结果证明：发酵液提取物中没有检测出二氢绿胶霉素。经过丙酮和硫酸铵沉淀试验结果证明：在稗草根生长的活性测试中，用丙酮沉淀分离的蛋白没有表现出抑制作用，其上清液也没有表现出抑制作用；而用硫酸铵沉淀所分离的蛋白对稗草根部抑制作用表现明显，抑制率达到32.95％，且1％差异显著。在进一步的分级沉淀中，硫酸铵50％-100％饱和度分离的蛋白对稗草根部的抑制率达到39.60％，且5％差异显著。本研究认为REMI转化子TaB3产生的一种抑草素物质基本上不是早先报道的绿胶霉素的衍生物二氢绿胶霉素，而可能是某种蛋白类物质。为了寻找转化子中与抑草素相关基因，本研究通过Southern blot和质粒拯救技术研究TaB3插入位点分子特性。所有抑草效果明显稳定的几个转化子都有，并且多数只有一条稳定的大小在20kb左右的杂交条带。TaB3为单位点插入，但该位点不是单拷贝，而是质粒串联插入，还存在质粒和真菌基因组间隔连接的方式。并且得到了经REMI突变后限制性内切酶插入位点侧翼的3段序列。本研究为今后木霉菌一宿主植物非亲和互作、除草类蛋白农药的深度开发和抑草相关基因的克隆奠定基础。