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研究目的: 研究长链非编码RNAMALAT1基因对人上皮性卵巢癌细胞迁移与侵袭功能的影响，并探讨MALAT1与上皮性卵巢癌细胞上皮间质转化之间的关系，为获得卵巢癌治疗新靶点提供更多的理论依据。 研究方法: 1.采用qRT-PCR技术检测四株人卵巢癌细胞株（HO-8910、A2780、OVCAR3和SKOV3）和45对人上皮性卵巢癌组织及正常卵巢组织中MALAT1mRNA的表达水平，筛选出相对高表达和相对低表达MALAT1基因的细胞株用于后续实验，并分析MALAT1mRNA表达水平与卵巢组织临床病理资料之间的相关性； 2.合成特异性干扰MALAT1表达的shRNA，构建慢病毒shRNA载体，测序验证成功后，大量扩增慢病毒载体，在293T细胞内进行慢病毒载体的大量包装，经浓缩纯化后，测定慢病毒滴度，得到干扰慢病毒毒液和阴性对照慢病毒毒液，将病毒毒液感染OVCAR3细胞，结合荧光和嘌呤霉素药物筛选，获得稳定转染该载体的OVCAR3细胞株及其阴性对照细胞株，并运用qRT-PCR技术检测转染细胞株中MALAT1mRNA的表达； 3.体外瞬时转染实验：将pcDNA3.1(+)-MALAT1过表达重组质粒转染SKOV3细胞，作为过表达实验组；以pcDNA3.1(+)空质粒转染SKOV3细胞，作为阴性对照组；并运用qRT-PCR技术检测转染24h、48h及72h后细胞中MALAT1mRNA的表达； 4.Transwell迁移与侵袭实验：检测MALAT1d的表达对卵巢癌细胞迁移、侵袭功能的影响； 5.构建裸鼠转移瘤模型：将稳定转染MALAT1-shRNA的OVCAR3细胞经裸鼠尾静脉注射至第一组动物体内，作为实验组；将其阴性对照细胞同法注入第二组动物体内，作为阴性对照组。两组分笼饲养，饲养条件均相同，记录小鼠体重与摄食量变化。培养60天后，安乐死处理各组小鼠，解剖观察各组小鼠肺部肿瘤转移情况，并运用HE染色方法观察组织形态学改变，以进一步证实肿瘤转移； 6.探讨MALAT1促进卵巢癌细胞迁移、侵袭功能的分子机制：首先，用转化生长因子β1（TGF-β1）刺激人上皮性卵巢癌细胞，通过WesternBlot实验检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达，并运用qRT-PCR方法检测MALAT1mRNA的表达；进一步地，用TGF-β1刺激人上皮性卵巢癌细胞的同时，分别上调和下调MALAT1基因的表达，采用WesternBlot方法检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达，同时检测转录因子Snail蛋白的表达； 7.统计学分析 应用SPSS19.0软件进行统计学分析，数据结果以??±s表示。样本之间的差异比较：两组数据间的比较采用Student’st检验和卡方检验的Fisher确切概率法；多组数据间的比较采用方差分析和LSD检验；相关性分析采用Spearman等级相关分析方法；检验水准为α＝0.05，P<0.05为差异具有统计学意义。 研究结果: 1.MALAT1mRNA在上皮性卵巢癌组织中的表达显著高于正常卵巢上皮组织（p<0.05）,其表达水平与卵巢癌的FIGO分期成正相关（r=0.807，p<0.000），而与患病年龄、组织学类型、分化程度、是否伴有腹水转移等无统计学相关（p>0.05）； 2.MALAT1mRNA在四株上皮性卵巢癌细胞中均有表达，其中在OVCAR3细胞中表达相对最高，在SKOV3细胞中表达相对最低（p<0.05）； 3.上调MALAT1基因的表达，可促进上皮性卵巢癌细胞株SKOV3的迁移与侵袭能力（p<0.05），而下调MALAT1的表达显著抑制卵巢癌细胞株OVCAR3的迁移与侵袭能力（p<0.05）； 4.裸鼠转移瘤模型实验：实验过程中，两组小鼠之间的体重与摄食量差异，无统计学意义（p>0.05），而肺部重量，NC组显著大于实验组（p<0.05）；解剖发现：阴性对照组中，有5只小鼠肺脏均可见明显肿瘤病灶，1只小鼠肺部未见明显异常（另有2只小鼠于实验结束前意外死亡），而实验组中8只小鼠肺部中均未发现肉眼可见的肿瘤转移灶。HE染色：阴性对照组肺部转移灶组织可见较多异质性肿瘤细胞围绕支气管和血管周围，而实验组肺脏未见明显异常； 5.用TGF-β1刺激卵巢癌细胞后，WesternBlot结果显示：E-cadherin蛋白表达下调，而N-cadherin、Vimentin蛋白表达均上调（p<0.05）,同时qRT-PCR结果显示MALAT1mRNA表达受到上调（p<0.05）；用TGF-β1刺激卵巢癌细胞的同时上调MALAT1的表达，WesternBlot结果显示：E-cadherin蛋白表达进一步减弱，而N-cadherin、Vimentin蛋白表达均继续加强，同时发现Snail蛋白表达增加（p<0.05）；互补实验中，下调MALAT1的表达，可上调E-cadherin蛋白的表达，而N-cadherin和vimentin蛋白的表达相对减弱，同时伴有Snail蛋白表达减弱（p<0.05）。 研究结论: 1.长链非编码RNAMALAT1在人上皮性卵巢癌组织中异常高表达，且其表达与卵巢癌的FIGO分期成正相关，提示MALAT1可能参与卵巢癌的发生发展过程； 2.从体内体外两个层面证实：上调MALAT1基因的表达，可显著促进卵巢癌细胞的迁移与侵袭能力，提示MALAT1可能参与卵巢癌的转移过程； 3.TGF-β1可诱导卵巢癌细胞发生EMT，同时上调了细胞中MALAT1基因的表达；MALAT1可调控卵巢癌细胞发生EMT，且可能是通过转录因子Snail发挥调控作用，从而影响卵巢癌的转移。