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针对当前农业废弃物资源化利用产物单一、效率不高的问题,本研究采用猪粪和青贮玉米秸秆为发酵原料进行混合发酵,以厌氧发酵中间代谢产物短链羧酸(SCCAs)为目标产物实现增值化利用,探究碳氮比(C/N比)(12.7、15、20、25、30、35、45和50.2)对SCCAs浓度及组分的影响,在获得最适C/N比的基础上开展了不同有机负荷(OLR)(2、3、3.5和4 g VS/L·d)对SCCAs浓度和组分以及发酵稳定性的影响,明确了不同C/N比和OLR条件下的优势菌群,以期为农业废弃物的定向产酸及微生物功能菌剂培养提供依据,为优化农业废弃物增值化利用提供借鉴。1)C/N比对SCCAs的浓度及组分均有显著性影响。当C/N比为25时发酵第18天SCCAs浓度达到最大值,为26214±2948 mg COD/L,在C/N比为35时发酵第12天,乳酸(LA)产量最大值为468.5±44.3 mg COD/g VSadded,而挥发性脂肪酸(VFAs)在C/N比为12.7发酵第12天时产量最高,达到601.1±42.4 mg COD/g VSadded。C/N比为12.7、15和20时,SCCAs组分以VFAs为主,而C/N比为30、35、45和50.2时,LA成为SCCAs主要成分。C/N对VFAs组分分布有显著性影响,随着C/N比增加VFAs组分种类减少。C/N比从12.7增加到20,乙酸的组分占比降低,而C/N比从12.7增加到25时己酸组分占比增多,C/N比继续增加己酸占比逐渐减少并低于检测限,而在不同C/N比条件下丁酸均是VFAs的主要成分。不同C/N比条件下发酵体系中微生物群落结构存在显著差异:随着C/N比增加梭状芽孢杆菌属(Clostridium)相对丰度有所降低,而乳酸杆菌(Lactobacillus)的相对丰度显著增加;C/N比为25时Clostridium和产己酸细菌(Caproiciproducens)为优势菌属;而C/N比为35时Lactobacillus和Clostridium为优势菌属。2)随着OLR提高SCCAs浓度及己酸占比显著增加。在发酵的第105天OLR为3.5 g VS/L·d时,SCCAs浓度最高,为19082 mg COD/L;OLR为3.5和4 g VS/L·d时SCCAs最高浓度高于OLR为2和3 g VS/L·d时SCCAs最高浓度,但OLR较高时发酵稳定性低,产量波动性较大。OLR对产酸组分及水解酸化过程具有显著性影响。当OLR为2 g VS/L·d和3 g VS/L·d时,VFAs以乙酸和正丁酸为主,在OLR为3.5和4 g VS/L·d时,己酸占比显著增加,高OLR条件下有助于碳链延长。另外,随着OLR增加,水解率呈下降趋势,最高为50.61%,酸化率和SCC As产率先增加后降低,OLR为3 g VS/L·d时酸化率最高为50.80%,SCCAs产率在OLR为3.5时最大为0.45 mg COD/mg VS,酸化过程是影响SCCAs产率的限速阶段。不同OLR会显著影响发酵体系中的微生物群落组成,当OLR从3.5 g VS/L·d增加至4 g VS/L·d时,Lactobacillus的相对丰度随OLR增加而增加,Bifidobacterium相对丰度降低,而耐酸性更强的Aeriscardovia菌属相对丰度增加。