水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)属于呼肠孤病毒科（Reoviridae）斐济病毒属（Figivirus）。感染RBSDV的水稻植株表现出明显的症状，包括植株矮缩、分蘖增多、叶色浓绿、沿茎和叶脉出现瘤状突起等。该病毒基因组由10条dsRNA组成，根据其在聚丙烯酰胺凝胶上的迁移率依次命名为S1-S10。第5条基因序列(S5)包括两个开放阅读框(ORF)，编码两个蛋白（p5a和p5b）。已有研究表明p5b是一个非结构病毒蛋白，大小约为26.5 kDa，但其功能尚不清楚。根据基因序列比对分析及其表达模式推测p5b可能与病毒的致病性及其在植物体内的增殖过程相关。　　 为了研究p5b的功能，我们先扩增获得p5b基因并将其连接到质粒pGBKT7诱饵载体上，将重组质粒命名为pGBKT7-p5b，然后将其转化到酵母Y2H Gold菌株中。Western blotting检测表明p5b蛋白可以在酵母菌株中有效表达，并且p5b蛋白在酵母中不存在毒性和自激活活性。同时，我们利用pGADT7-DEST载体与Gateway技术构建了水稻cDNA表达文库。用转有pGBKT7-p5b的酵母Y2H GOLD菌株与含有水稻cDNA文库质粒的酵母Y187菌株进行Mating试验，Mating产物涂布在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp和SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal培养基平板上，筛选与p5b互作的水稻基因。将筛选到的克隆扩大培养后抽提质粒并测序，经过序列分析和验证后，共筛选到8个在酵母中与p5b互作的水稻基因。通过双分子荧光互补试验证实p5b与其中一个寄主因子（核糖核酸酶）在植物体内存在互作。序列分析显示这些筛选到的寄主因子是参与植物光合作用、呼吸作用和其他一些重要代谢途径的关键酶，暗示这些蛋白互作可能与病株症状的产生发展有关。　　 此外，本研究还进一步应用不同的方法分析了p5b在植物和昆虫细胞中的定位。利用烟草瞬时表达系统研究发现，p5b-GFP融合蛋白在细胞质和细胞核中均有分布。在Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统中，p5b-GFP融合蛋白分布在昆虫细胞细胞质中，并且荧光出现聚集现象。在水稻病叶超薄切片中，观察发现在染病水稻细胞的细胞质、叶绿体、线粒体、细胞器中均有胶体金颗粒分布。这些研究结果为后续RBSDV p5b功能的研究奠定了基础。