弹性蛋白是人体内一种重要的结构蛋白,广泛存在于血管、肺、韧带、皮肤等结缔组织中。它有着维持组织形态,赋予组织伸缩形变的功能。弹性蛋白作为医用材料的理想原料,具有良好的生物相容性。利用基因重组制备的弹性蛋白,具有序列可控、成本低廉、可大规模生产及免疫原性低等优势,是目前弹性蛋白最佳的获取方式。因此,如何在原核生物重组体系内高效表达和纯化弹性蛋白,并制备高力学强度、高生物活性的弹性蛋白医用材料,是组织工程领域的热点问题。本论文旨在设计和开发一种高效的弹性蛋白表达体系,解决现有重组弹性蛋白体系序列单一、仿生度较差等问题;在此基础上,以高活性重组弹性蛋白为原料,制备机械强度高、生物相容性好的弹性蛋白凝胶,为皮肤修复敷料、人工皮肤等医用材料的研发提供新的应用策略,主要内容如下:1.以人源全长弹性蛋白作为序列设计的主要参考来源,选取其中的关键结构域,构建重组人源弹性蛋白序列RE（Recombinant Elastin）;同时在RE序列N端引入Sc12折叠结构域（V-foldon）,构建重组融合弹性蛋白RFE（Recombinant Fusion Elastin）。利用重组大肠杆菌BL21体系进行高效表达,再通过镍离子亲和色谱法进一步纯化,制备高纯度的重组人源弹性蛋白与重组融合弹性蛋白。2.天然弹性蛋白具有可逆相变的特征性质。可逆相变实验表明,重组人源弹性蛋白RE具有与天然弹性蛋白相近的温敏聚集行为。圆二色谱实验结果表明重组人源弹性蛋白RE具有天然弹性蛋白的二级结构。在此基础上,使用四羟甲基氯化磷（THPC）对重组人源弹性蛋白RE进行交联改性,制备出性质稳定、力学性能优异的弹性蛋白凝胶材料。该凝胶材料微观尺度上具有规整、均一的三维网孔状结构;材料具有良好的生物活性,能够支持细胞在材料表面存活并增殖。在动物实验中,该凝胶无免疫排斥反应,有效的减轻了创面的炎症,促进了小鼠受损皮肤的愈合再生过程,在皮肤医学等领域具有较高的临床应用价值。3.重组融合弹性蛋白RFE同样具有可逆相变的温敏聚集特性,同时V-foldon结构域明显增加了弹性蛋白二级结构的有序性,并调控弹性蛋白的相变聚集过程,使其呈现三聚体的聚集过渡态,进而使得重组蛋白的相变温度降低,更接近于天然弹性蛋白的性质。此外,相较于人源弹性蛋白RE,重组融合弹性蛋白RFE具有更高的蛋白表达量,相近的生物活性与交联能力,所形成的凝胶材料作用于小鼠皮肤紫外损伤模型,也具有良好的修复效果。