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背景与目的:食管癌是世界范围内第八大常见恶性肿瘤,死亡率位于第六位。在中国,食管癌的发病率排在所有恶性肿瘤中的第三位,死亡率排在第四位。食管癌的发病有明显的地域特点,中国南部沿海的潮汕地区,是一个食管癌特别高发的地区,其中又以食管鳞状细胞癌为绝大多数。在肿瘤研究中,细胞系有非常重要的地位,可以通过细胞学实验对肿瘤的演进、转移和治疗等方面进行探索。但是,目前鲜见来自潮汕地区的食管鳞癌细胞系可供广大科研人员使用。 本研究希望通过对内镜活检钳取的潮汕地区食管鳞癌组织进行癌组织.原代培养,进而获取可稳定传代的食管鳞癌细胞系。以期为食管鳞癌的研究提供更有价值的研究工具。 材料和方法: 1.组织标本本校附属肿瘤医院内镜室的内镜活检钳取的食管癌标本。 2.组织细胞原代培养在超净台中将标本切碎成1mm3的小块,接种于T-25培养瓶,通过胰酶差速消化法获得纯净的癌细胞。 3.细胞免疫荧光染色对传代的细胞进行细胞来源以及增值活性的鉴定。 4.PCR检测细胞系HPV病毒感染情况。 5.DNA STR绘谱对本细胞系是否被其他已知细胞系污染进行鉴定。 6.光谱核型分析对本细胞系的核型进行描述。 7.细胞体外转移、侵袭实验对本细胞系的体外转移和侵袭能力进行探究。 结果: 1.原代培养的细胞已传代50带,相差显微镜下形态学符合食管鳞状细胞癌细胞的形态特点。 2.细胞免疫荧光染色结果显示本细胞系为上皮组织来源细胞,分裂指数约为67.1%。 3.细胞生长曲线显示本细胞系从第5代至第50代持续保持旺盛且一致的生长状态。 4.PCR结果显示本细胞系未感染HPV。 5.STR鉴定结果显示本细胞系为新的且未被其他已知细胞系污染的细胞系。 6.核型分析结果显示本细胞系主要克隆为近三倍体,并且有着染色体数目和结构的复杂改变,符合癌细胞的核型特点。 7.ECST109细胞的3号染色体断裂位点p11与脆性位点FRA3B位置较一致,提示此区域内的FHIT基因可能在本细胞系来源的患者食管癌发生发展的过程中发挥了作用 8.细胞体外转移和侵袭实验表明本细胞系具有一定的转移和侵袭能力,但是弱于KYSE520细胞系。 结论:本研究通过组织细胞原代培养法成功建立了一株可以稳定传代培养的潮汕地区食管鳞状细胞癌细胞系ECST109,并对其组织来源、基本生物学特性、HPV感染情况和是否与其他细胞系存在交叉污染进行了研究、鉴定。为进一步研究潮汕地区食管鳞癌提供了可靠的细胞学研究工具。