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目的:观察As<,2>O<,3>与Aspirin单独及联合应用对人胃癌SGC-7901细胞抑制生长、诱导凋亡的生物学效应，探讨As<,2>O<,3>与Aspirin两种药物是否具有协同抗癌效应，联合应用是否可以降低两药的用量，初步探讨As<,2>O<,3>与Aspirin抑制胃癌生长的可能机制，为临床用药提供实验和理论依据。
方法:细胞培养：人胃癌SGC-7901细胞常规培养于含有10％新生牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的RPMI 1640培养液中，在37℃，5％CO<,2>及饱和湿度培养箱中贴壁培养。将As<,2>O<,3>与Aspirin用培养液稀释成终浓度为As<,2>O<,3>(1、2、4、8μmol/L)；Aspirin(0.5、1、2、4mmol/L)以及两者联合终浓度As<,2>O<,3>(2μmol/L)+Aspirin(1mmol/L)，As<,2>O<,3>(2μmol/L)+Aspirin(0.5mmol/L)，As<,2>O<,3>(1μmol/L)+-Aspim(1mmol/L)，作用于SGC-7901细胞后72小时，采用MTT法检测两药单独及联合应用后肿瘤细胞生长抑制率(IR)；流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞凋亡及细胞周期的改变；HE染色、光学显微镜观察细胞形态学改变；免疫细胞化学染色(SP法)检测信号转导分子IKKα、COX-2、VEGF及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达：Western blot检测IKKα、IкBα、NF-кB、COX-2、VEGF蛋白表达的改变。
结果:
1．As<,2>O<,3>及Aspirin均可抑制胃癌细胞SGC-7901的生长，两药单独作用于SGC-7901细胞后48小时，8μmol/L As<,2>O<,3>组及4mmol/L Aspirin组细胞生长抑制率分别为40.56％、20.41％，与阴性对照组相比，差异均有统计学意义(P<0.05)；作用后72小时，4μmol/LAs<,2>O<,3>组(31.04％)及2mmol/L Aspirin组(16.11％)与阴性对照组相比，抑制率的差异亦具有统计学意义(P<0.05)；2μmol/LAs<,2>O<,3>+1mmol/L Aspirin联合用药组的生长抑制率为24.19％，与阴性对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)，并且与2μmol/L As<,2>O<,3>(5.96％)及1mmol/L Aspirin(4.86％)单用药组相比，抑制率的差异均有统计学意义(P<0.05)；后两组单用药组与对照组的差异无统计学意义。
2．FCM检测结果显示阴性对照组SGC-7901细胞的凋亡率(AR)是1.55％，2μmol/L As<,2>O<,3>组、1mmol/L Aspirin组及2μmol/LAs<,2>O<,3>与1mmol/L Aspirin联合应用组的AR分别是1.81％、1.64％、19.01％，2μmol/LAs<,2>O<,3>组和1mmol/L Aspirin组与阴性对照组AR的差异无统计学意义；而2μmol/LAs<,2>O<,3>与1mmol/L Aspirin联合应用组的AR与阴性对照组、2μmol/L As<,2>O<,3>组及1mmol/L Aspirin组相比，差异均有统计学意义(P<0.05)；4μmol/L As<,2>O<,3>将SGC-7901细胞的细胞周期阻滞在G<,2>/M期，2mmol/L Aspirin使其阻滞在G<,0>/G<,1>期，联合用药组细胞G<,0>/G<,1>期、G<,2>/M期比例均增加，S期细胞比例减少。
3．随着实验组给药浓度的增加或联合应用两药，HE染色观察到细胞变小变圆，有凋亡小体形成，胞浆中出现空泡，部分细胞脱落漂浮于培养基中，随药物剂量增大，作用时间延长，上述现象越加明显。
4．免疫细胞化学染色结果显示：随着药物浓度的增加，胃癌细胞中IKK、COX-2、VEGF的表达率逐渐减少；Bax的表达率逐渐增高，Bcl-2表达率逐渐减少，2μmol/L As<,2>O<,3>+1mmol/L Aspirin联合用药组与阴性对照组、2μmol/L As<,2>O<,3>组及1mmol/L Aspirin组相比，差异均有统计学意义(P<0.05)。
5．Western blot检测结果显示As<,2>O<,3>与Aspirin作用后，胃癌细胞总蛋白中IKKα、COX-2、VEGF蛋白的含量降低；非磷酸化IкBα蛋白的含量增高，核蛋白中NF-кB的含量均降低。2μmol/L As<,2>O<,3>+1mmol/L Aspirin联合用药组与阴性对照组、2μmol/LAs<,2>O<,3>组及1mmol/L Aspirin组相比，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论
1．As<,2>O<,3>与Aspirin联合应用具有较明显的协同作用，联合应用可以降低两药的用量。
2．As<,2>O<,3>与Aspirin均可通过抑制Bcl-2的表达、促进Bax的表达，升高Bax/Bcl-2比率，抑制SGC-7901细胞的增殖，促进其凋亡。
3．As<,2>O<,3>与Aspirin均可通过抑制IKK、IкB、NF-кB的活性，抑制Bcl-2的表达，抑制胃癌细胞生长。
4．As<,2>O<,3>与Aspirin均可通过抑制NF-кB的活性，抑制COX-2、VEGF的表达，从而有可能对胃癌血管生成的机制产生影响。