研究目的:　　 鼻咽癌是我国南方最常见的头颈部恶性肿瘤之一,目前的治疗方式主要是以放射治疗为主。临床中经常碰到相同病理类型、分级和分期的患者,采取相同的放射治疗方式,但治疗结果却大不相同,有的对射线极为敏感,而有的则表现为放射抵抗,导致肿瘤残留、复发、转移等,成为鼻咽癌治疗失败的主要原因。这一现象提示不同鼻咽癌患者的肿瘤细胞可能对放射敏感性不同。本课题拟从鼻咽癌细胞株中新进发现的与放射敏感性相关的gp96基因在鼻咽癌组织中的表达出发,探讨该基因对于鼻咽癌患者放射敏感性及预后的影响,以及该基因及相关蛋白与细胞存活重要信号通路PI3K/Akt通路之间的关系,探讨其可能的机制。　　 研究方法:　　 (1)从肿瘤专科医院住院患者中抽取有5年以上完整随访资料的鼻咽癌患者,获得其鼻咽部活检的石蜡切片,行gp96免疫组化染色,同时根据其对放射治疗的反应性进行分组,比较不同分组中其染色评分的差异,gp96表达情况与患者总生存率、无病生存率之间的关系。　　 (2)新诊断鼻咽癌患者和鼻咽非恶性肿瘤患者中留取鼻咽部活检标本,经液氮低温保存后,Western blotting及荧光定量PCR分别检测gp96蛋白和mRNA表达水平,比较其表达差异。　　 (3)新诊断鼻咽癌患者鼻咽部活检组织标本,根据放射治疗敏感性分组(抵抗组和敏感组),经液氮低温保存后,Western blotting检测鼻咽癌患者的pAkt和Akt蛋白的表达情况,以及其与gp96蛋白表达之间的关系。　　 研究结果:　　 (1)收集了26例新诊断鼻咽癌患者和23例鼻咽非恶性肿瘤患者鼻咽部组织新鲜标本,通过Western blotting检测gp96蛋白表达水平,发现鼻咽癌组织中gp96蛋白表达高于鼻咽非恶性肿瘤患者。　　 (2)26例新诊断的鼻咽癌患者,根据其对放射治疗的敏感性,分为放射敏感组和放射抵抗组,Western blottingtiing检测pAkt和Akt蛋白表达水平,发现放射抵抗组的pAkt蛋白表达强于放射敏感组患者。　　 (3)收集了26例新诊断鼻咽癌患者和22例鼻咽非恶性肿瘤患者鼻咽部组织新鲜标本,通过荧光定量PCR检测mRNA表达水平,发现鼻咽癌组织中gp96mRNA表达高于鼻咽非恶性肿瘤患者。　　 (4)收集了98例满足5年完整随访资料且留有石蜡包埋标本的鼻咽癌患者资料。所有98例患者石蜡包埋标本经gp96免疫组化染色评分,发现评分高低与鼻咽癌临床T分期和放射治疗敏感性密切相关,与年龄、性别、临床N分期无关。　　 (5)Gp96与鼻咽癌患者放射敏感性的关系。高表达gp96的鼻咽癌患者表现放射抵抗,而低表达gp96的鼻咽癌患者表现放射敏感。　　 (6)Gp96表达与鼻咽癌患者总生存率和无病生存率之间关系。Gp96高表达的患者总生存率和无病生存率显著差于低表达者。单因素分析表明,临床肿瘤T分期、放射敏感性和gp96表达水平显著影响着鼻咽癌患者的生存率。Cox多因素比例风险模型分析提示,gp96是判断鼻咽癌患者总生存率的独立预后因子,但对于无病生存率而言,无预后作用。AJCC临床T分期是鼻咽癌总生存率和无病生存率的独立预后因子。　　 (7)鼻咽癌的放射抵抗与Akt蛋白的激活显著相关。　　 (8)Gp96蛋白表达与Akt蛋白激活之间存在显著的正相关性。　　 研究结论:　　 (1)gp96在鼻咽癌组织中的表达高于鼻咽非癌组织,说明与鼻咽癌的发生发展相关。　　 (2)gp96对鼻咽癌临床分期和放射敏感性有预示作用,gp96与鼻咽癌的放射抵抗机制相关。　　 (3)gp96在鼻咽癌患者中表达与Akt蛋白激活有明显的相关性,可能是通过激活以PI3K/Akt为中心的细胞存活通路来实现。　　 (4)gp96可作为鼻咽癌放射敏感性的分子指标,gp96基因可以作为基因放射增敏治疗的有效靶点。