PNA探针电化学传感器研制及沙门氏菌LT2株invA基因检测

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lxfsb001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研制一种基于肽核酸(PNA)探针的生物传感器,通过检测鼠伤寒沙门氏菌(LT2株)的吸附和侵袭上皮细胞表面蛋白编码基因(invA),实现对样品沙门氏菌的鉴定。  方法:采用三电极系统,将巯基修饰的PNA探针通过S-Au键共价固定在金电极表面作为工作电极,Ag/AgCl电极作为参比电极,铂丝为对电极,运用电化学阻抗谱(EIS)技术,检测PNA探针与目的基因杂交前后的阻抗差值(△Ret),根据△Ret和目的基因的线性关系,对样品DNA进行定性和定量。  结果:滴加PNA探针10μl,杂交温度60℃,杂交时间45min,传感器杂交前后的阻抗差值最大,为检测的最佳条件。在最优条件下,当目的DNA浓度在1.0×10-13 mol L-1-1.0×10-10mol L-1之间时,传感器杂交前后的阻抗差值与目的DNA的浓度对数呈现良好的线性关系,检出限为3.3×10-14 mol/L。与单链DNA探针相比,PNA探针传感器具有较宽的线性范围,较低的检测限,并且能够灵敏的识别三碱基错配DNA序列和~碱基错配的DNA序列。应用PNA探针传感器检测了鼠伤寒沙门氏菌(LT2株)提取的DNA,样品含量在线性范围内与传感器杂交前后的阻抗差值具有良好的对应关系,说明这种方法可以很好的用于实际样品的检测。连续3次测量样品浓度为1.0×10-10 mol/L的目的DNA杂交信号,相对标准偏差(RSD)为5.91%,探针再生后可重复使用5次。  结论:PNA探针传感器无需电极修饰即可固定探针,无需杂交指示剂即可检测目标序列DNA,既简化了实验步骤,又避免了因指示剂脱落使杂交信号衰减的弊端,获得了理想的杂交灵敏性和选择性,可用于实际样品的检测。
其他文献
中国分类号:G613.5  在多年来的教学实践中,我体会到兴趣是推动学生积极学习的强大动力,创设愉快的教学情景是推动学生积极学习的先决条件。因此,我在教学中注意发挥学生的主体作用,灵活运用多种愉快教育方法,激发学生的学习兴趣,收到了较好效果。  一、开动脑筋编儿歌,培养识谱兴趣  识谱知识的传授在音乐教学中是不可缺少的一部分。学生掌握好识谱知识,可以更加准确地唱好歌曲、理解歌曲。为使学生对枯燥无味
摘 要:大力提倡知识与能力、过程与方法、情感态度与价值观的当代教育中,中学历史教育也需要实实在在的作出相应的改进,现代中学生的成长背景是信息开放、价值多元化、文化交流频繁的当今社会,他们对于世界的认识处于较懵懂的状态,中学历史教育应具有适合现代社会变革和学生发展的新的价值追求,应追求:知识价值,能力价值(自我教育的能力、审美和创造美的能力、创新能力)、精神价值、世俗价值。  关键词:中学;历史教育
摘 要:误差理论与数据处理是高等院校测控技术与仪器专业的一门专业必修课。通过该课程的学习可以使学生掌握数据处理方法,正确估计被测量值,科学地评价测量结果。误差理论与数据处理具有理论性强,计算公式多等特点,传统教学模式教师常专注于基本理论的讲解,忽视了基于数据分析软件等实际应用训练环节,导致学生从事具体相关工作时手足无措,工作效率过低。本文以MATLAB为例探讨数据分析软件在误差理论与数据处理课程中
学位
目的:通过了解大庆市高中教师亚健康现状以及高中教师人格特质、应对方式和社会支持等,探讨大庆市高中教师亚健康状况的主要影响因素;为教师群体的健康教育和健康促进提供依据。
摘要:开卷考试如春风化雨,润物无声,即给老师减压又给学生减负,大家皆大欢喜。但这种欢愉的心情持续没多久,师生发现开卷考试并非想象的那么简单,不是简单的复制和粘贴,不是找找书,抄抄书。开卷考试体现“理在书中,题在书外”,考察学生对试题的采集、选择、加工、处理信息的能力,考察的基础知识、基础技能的同时更重视学生能力的培养。  关键词:政治中考 开卷考试 问题应对  中国分类号:G632.474  政治
新年伊始,中国唯一一家全国性英文日报《中国日报》进行了全面扩版和改版,以一个崭新的形象出现在读者面前。 一、求深 《中国日报》此次改版将重心放在对新闻的深度报道和
考查了国内外一系列网络资源评价指标体系,探讨了网络资源评价中存在的困难及评价指标的实现问题,认为评价性元数据和CORC系统是目前最佳的评价辅助工具。 Examines a serie
摘要:小学英语教学对英语学习者的长期学习效果起到越来越重要的奠基石的作用。因此,许多外语界的学者和一线的教师都积极探索小学英语教学的策略。本文将以第二语言习得理论为基础,结合现有的教学现状,分别从课堂组织形式,教学手段,教学方法三个方面,分析并提出小学英语教学可操作性的建议。  关键词: 第二语言习得理论;小学英语教学;教学应用  中国分类号:G623.31  自2001年以来,小学英语教学的开设
摘要:新一轮课程改革给教学带来了新气息,但作为临夏州这个少数民族地区的农村高中,由于基础教育落后,又使我们产生了许多问题与困惑。在教学实践中,我们不断探索解决问题的方法和策略。  关键词:历史 新课程 问题 对策与措施  中国分类号:G633.51  新课程一个重要的亮点就是贴近生活和现实,具有时代气息,这给教学提供了巨大的拓展空间,使历史与现实的结合成为可能。课堂教学充满了生机和活力。经过高中五