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目的从动物和细胞水平分别观察肝X受体(LXRs)激动剂TO901317对肝癌发生发展的作用及其机制,为肝癌治疗提供新的理论支撑。方法1.体外培养肝癌细胞,注射裸鼠皮下建立肝癌移植瘤模型。待成瘤后应用TO901317(25 mg/kg,腹腔注射,隔天给药),观察TO901317对肝癌移植瘤生长的影响。约4周后将裸鼠处死,将肿瘤剥离,称量瘤重;蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测瘤组织中肝X受体α(LXRα)、葡萄糖转运蛋白1(Glut1)和基质金属蛋白酶9(MMP9)表达的变化;葡萄糖检测试剂盒检测瘤组织葡萄糖变化情况。2.分别采用不同浓度(0μM,8μM,16μM,24μM,32μM)的TO901317处理两种不同侵袭能力的肝癌细胞24h,MTT法检测TO901317对肝癌细胞增殖能力的影响;葡萄糖检测试剂盒检测肝癌细胞内葡萄糖含量的变化;三磷酸腺苷(ATP)检测试剂盒检测肝癌细胞内ATP水平的变化;Transwell/划痕愈合实验检测肝癌细胞侵袭迁移能力的改变;Western blot实验检测肝癌细胞内LXRα、Glut1和MMP9表达的变化。3.siRNA沉降LXRα表达后,再加用TO901317处理细胞,分别检测LXRαsiRNA对肝癌细胞内LXRα、Glut1和MMP9表达,葡萄糖含量以及侵袭迁移能力的影响。结果1.成瘤后的裸鼠用TO901317治疗后,荷瘤小鼠移植瘤生长速率明显放缓。治疗结束后,治疗组肿瘤瘤重明显小于对照组(未用药组)。与此同时,TO901317能上调移植瘤细胞内LXRα,并下调Glut1和MMP9的蛋白表达,并且能明显降低移植瘤葡萄糖含量。2.MTT实验结果表明,TO901317能浓度依赖性的抑制肝癌细胞增殖能力。葡萄糖检测试剂盒结果发现,随着TO901317用药浓度的升高,肝癌细胞内葡萄糖含量逐渐减少;ATP检测试剂盒分析发现,TO901317能明显下调肝癌细胞内ATP水平;Western blot分析表明,TO901317浓度升高,肝癌细胞内LXRα表达逐渐上调,而Glut1和MMP9表达则逐渐下调;Transwell/划痕愈合实验表明,TO901317能抑制肝癌细胞侵袭迁移能力。3.LXRαsiRNA转染肝癌细胞后,TO901317上调LXRα,抑制Glut1和MMP9表达的能力被减弱。LXRαsiRNA转染组葡萄糖含量明显升高,侵袭迁移能力显著增强。结论TO901317能上调LXRα、下调Glut1表达,降低肝癌细胞葡萄糖含量,下调MMP9表达,进而抑制肝癌进程。