目的 本实验通过在建立人肝癌多药耐药细胞株(Bel-7402/Dox)的过程中,观察一种新的凋亡抑制因子Survivin的表达,探讨Survivin与人肝癌细胞多药耐药的关系。 方法 用阿霉素(Doxorubicin, Dox)浓度梯度递增诱导法,建立人肝癌多药耐药细胞株Bel-7402/Dox。在建立Bel-7402/Dox过程中,加入阿霉素浓度分别为0.05μg/ml、0.1μg/ml、0.2μg/ml时,用MTT法(四唑盐比色法)检测肝癌细胞抑制率、流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡率,同时用Western blot检测其Survivin蛋白表达;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测人肝癌多药耐药细胞株Bel-7402/Dox Survivin mRNA的表达。 结果 随着建立人肝癌多药耐药细胞株培养液中阿霉素浓度的增加(0.05μg/ml、0.11μg/ml、0.2μg/ml),肝癌细胞抑制率增加,凋亡率明显增加,P<0.05,Survivin蛋白的表达逐渐增强。RT-PCR检测Bel-7402/Dox Survivin mRNA表达阳性。 结论 阿霉素作用于肝癌细胞,抗癌作用与诱导细胞凋亡有关;Survivin的表达变化可能与人肝癌细胞获得性耐药有关。