透明质酸(HA)是一种广泛存在于人和动物体各组织中的酸性粘多糖,具有重要的生理功能,已被广泛的应用于医药及化妆品等各领域。但目前我国的HA生产主要是通过组织提取法获得,其产品不能满足市场日益增长的对HA的需求,因此开发先进的发酵法生产HA的技术就十分必要,而开发出一套完整的HA下游分离工艺则是将发酵法应用于实际生产的关键。 目的:研究出一条可用于微生物发酵法生产HA的完整的下游分离工艺路线及其技术参数,使发酵的HA产品达到化妆品级HA的质量标准。方法:采用兽疫链球菌Streptococcus zooepidemicus进行分批补料式发酵培养。对得到的发酵液进行HA分离提取;分别对发酵液的预处理、除菌体、分离、纯化、干燥、粉碎等工艺条件进行了研究。通过检测HA得率,分子量损失和蛋白去除率等指标,选择出最佳的提取方法和条件,并通过中试检验其效果。结果:得到了一条适用于发酵法生产HA的工艺路线及相关工艺条件,并通过了中试检验。最后得到的HA产品为白色粉末,HA得率约70%,分子量高于1.4×10~6,蛋白含量低于0.5%,葡萄糖醛酸含量为39.1%,并经红外,紫外光谱分析,基本达到了化妆品级HA的要求。结论:获得了一套可用于发酵法生产HA的下游分离工艺路线和技术参数,对HA的工业化发酵生产具有实用意义。