论文部分内容阅读
细胞周期的两个重要时相转换G1→S和G2→M转换中设有各自“关卡”（checkpoint），以G1期后期限制点（restriction point）为最重要。通过严格控制“关卡”通行，能实现细胞周期精确调控。细胞周期调控失常导致细胞增殖失控、基因受损突变和致癌，与肿瘤生长进展密切相关。因此有人认为，肿瘤发生根本原因在于基因组不稳定，G1/S和G2/M“关卡”失控，使本来应停止增殖或凋亡的细胞不断进入细胞周期，造成恶性增生。细胞周期受细胞周期蛋白（cyclin）和细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）正性调节，而细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂（CDKIs）通过与cyclin-CDK复合物结合抑制蛋白激酶活性，起细胞周期负性调节作用。p27Kipl为CDKIs成员，能最直接影响G1期限制点调控，是一种新型抑癌基因，是近年来国外研究较多的一种新的肿瘤预后因子。p27Kipl基因突变罕见，而p27Kipl蛋白表达异常与多种肿瘤发生发展有关。有关肝细胞癌（HCC）中p27Kipl基因及表达蛋白产物变化的研究尚不多见。细胞凋亡见于几乎所有的恶性肿瘤，已成为重要的肿瘤细胞动力学改变和生物学特征，是影响肿瘤进展和预后的重要因素，常用于作为判断肿瘤预后的指标。研究发现，在HCC中癌细胞高度增生和高度凋亡经常并存，细胞凋亡对于HCC生长过程起重要作用。研究p27m…蛋白表达状况与细胞凋亡关系对于明确其在HCC发生发展中的作用和预后判断具有重要意义。 材料与方法 采用免疫组化SP法检测33例肝癌组织、25例癌旁组织、门例正常肝组织中p27Ki’l蛋白表达状况，并分析与年龄、性别、肝硬化、HsAg、MP＆达、肿瘤直径、肝内外转移情况、分化程度、Edmonson病理分级、PCNA表达、细胞凋亡率等关系，分析 p27m一蛋白测定在肝癌临床中的地位，推测其在HCC增殖进展中的作用。全部病例术前均未接受化疗或放疗，均有完整临床痫理资料。并作常规HE染色以判断病理特征和分化程度。 结果与讨论 测定33例HCC的 p27KIPI蛋白表达指数…27LI)平均值为613士236％，高于癌旁组织（p27LI＝ous土24．6％，001rtPwto刀2），癌旁组织高于对照组肝组织 （p27LM、4士 37％，P ＜ 005），这一结果与Liood、Ito等报道相符，说明在HCC中确实存在p27K‘一表达异常。 在对p27K…蛋白表达与临床病理指标关系分析中发现p27“…蛋白表达水平与年龄、性别、肝硬化、HBSAg、AFP表达等指标无明显相关性，而与一些反映肿瘤进展和侵袭性等生物学特征指标有关，在巨块型肝癌、有肝内外转移、低分化和Edmonson病理分级高PCNA高表达的HCC中 p27KIPI蛋白表达水平明显下降。从而证实在HCC中p27K”‘具有抑制肿瘤细胞增殖和进展作用。 同时还测定凋亡指数（AJ）平均值为l、7士1．8％，发现HCC中蛋白阳性表达率与细胞凋亡率呈正相关（，0．8597，P＜0001），p27LI增高，AJ随之增高，结合临床病理指标为肿瘤直径小、无转移、分化程度较高、Edmonson病理分级低 第3页和PCNA低表达的HCC，其增殖侵袭能力和恶性度相对较低，预后较好；p27LI下降，AI随之下降，为巨块型、有肝内外转移、低分化、Edmnson病理分级高和PCNA高表达的HCC，其增殖侵袭能力和恶性度相对较高，预后不良。推测HCC中p27K…蛋白高表达所起的肿瘤抑制机制是通过诱导肝癌细胞凋亡作用来实现的。认为测定p27聊l蛋白表达水平可作为评价肝细胞癌增殖进展和预后判断的一个有用指标。 结论 1、应用免疫组化方法研究肝细胞癌中p27聊‘基因蛋白表达具有简便快捷直观的特点。 2、证实在肝细胞癌中存在p27b’‘蛋白表达异常，癌组织、癌旁组织表达水平较高。 3、p27 K‘”蛋白表达水平与肿瘤直径、肝内外转移情况、分化程度及Edmonson病理分级、PCNA表达水平有关，提示p27ki’l蛋白表达与HCC的侵袭、发展有关，具有抑制HCC增殖和进展作用。 4、肝细胞癌中p27K‘’l蛋白表达水平与癌细胞凋亡率正相关，推测其肿瘤抑制机制可能是通过诱导肝癌细胞凋亡作用来实现的。测定p27【巾‘蛋白表达水平可作为评价肝细胞癌增殖进展和预后判断的一个有用指标。 5、展望：对p27一的进一步研究应用分子生物学方法将正常p27—‘基因导入肝癌细胞的基因治疗将有助于改善和提高肝细胞癌疗效。