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关节软骨损伤的修复是骨科面临的难题之一，目前尚未得到很好地解决。传统的治疗如软骨下骨钻孔、磨削、微骨折等存在一定的不足，自体骨软骨、骨膜或软骨膜移植可造成附加损伤，且其来源有限，异体组织的排异反应问题尚未得到很好解决；近年来组织工程的发展有望成为治疗软骨损伤的新方法。左旋聚乳酸、聚己内酯共聚物由于具有良好的生物相容性、可生物降解性被广泛用于医学领域，通过调整二者的合成比例等手段可获得符合生理需要的支架材料，具有纳米表面结构的左旋聚乳酸/聚己内酯复合物能仿生细胞外基质结构具有较好的应用前景；骨髓基质干细胞能被TGF-β<,1>、IGF-I诱导分化为软骨细胞，目前被认为是理想的种子细胞。本文将从三个方面探讨用组织工程方法修复犬关节软骨损伤缺损及其相关问题。
1.纳米左旋聚乳酸/聚己内酯与犬骨髓基质干细胞体外生物相容性实验。
目的：
研究具有纳米结构二嵌段共聚物左旋聚乳酸/聚己内酯(PLLA-b-PCL)与犬骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外生物相容性，探讨其作为软骨组织工程支架的可行性。
方法：
开环聚合制备PLLA-b-PCL，液一液相分离制备PLLA-b-PCL纳米支架，扫描电镜观察材料结构；分离培养犬BMSCs，取第3代BMSCs接种于PLLA-b-PCL膜进行复合二维培养，MTT法检测细胞毒性；通过倒置显微镜、Hoechst33342荧光法观察细胞的形态与粘附状况；另取第3代BMSCs与纳米PLLA-b-PCL(实验组)、PLLA-b-PCL(对照组)支架材料上进行三维培养3周，扫描电镜观察BMSCs的形态、粘附、生长状况，Hoechst33258荧光法检测复合物中细胞DNA含量、BCA法测定蛋白质含量。 结论：
PLLA-b-PCL纳米支架能为BMSCs的生长分化提供较好的环境，具有良好的生物相容性，有望成为一种较好的软骨组织工程支架材料。
2.诱导骨髓基质干细胞(BMSC)向软骨细胞分化的实验。
研究目的：
探索用TGF-β<,1>、IGF-I在体外诱导犬BMSc向软骨细胞分化的可能性。
方法：
自犬髂后嵴处抽取10ml骨髓后在体外行原代和传代培养，实验分为2组，实验组培养液中含TGF-β<,1>、IGF-I；对照组常规培养及传代。传代细胞爬片行番红-0染色、甲苯胺兰染色、免疫组织化学染色。
结论：
本研究用TGF-β<,1>、IGF-I有效地诱导BMSC向软骨细胞分化，BMSC源性软骨细胞有望作为软骨组织工程修复关节软骨损伤的较理想的种子细胞。
3.骨髓基质细胞源性软骨细胞/纳米PLLA-b-PCL修复犬关节软骨缺损的实验研究。
目的：
在体外将BMSC扩增、诱导为软骨细胞后，探讨以纳米左旋聚乳酸/聚己内酯(纳米PLLA-b-PCL)为载体修复犬关节软骨缺损的可行性。
方法：
选取12月龄实验用犬10只，无菌条件下自髂后嵴处抽取骨髓10ml，行原代及传代培养，传代培养时培养液中含TGF-β<,1>，(10ng/ml)、IGF-I(50ng/ml)诱导BMSC向软骨细胞分化。第二代细胞消化、收集后，调整细胞密度为2.0×10<6>/ml，与纳米PLLA-b-PCL共培养24小时，即制成纳米PLLA-b-PCL支架细胞复合物。在犬右膝关节股骨髁、股骨滑车部造成直径6mm，深4mm的软骨缺损，在右侧5个膝关节植人纳米PLLA-b-PCL支架细胞复合物，为实验组，另外右侧5个膝关节造成缺损后旷置，留作空白对照。术后12w，24w取材，行大体及组织学观察，组织学评分。
结论：骨髓基质细胞源性软骨细胞是修复关节软骨缺损较理想的种子细胞：纳米PLLA-b-PCL在新生软骨形成的同时，逐渐降解吸收，是组织工程修复关节软骨缺损的适宜的支架材料，具有良好的应用前景。