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目的：磁性纳米四氧化三铁（magnetic Fe3O4 nanoparticles，Fe3O4-MNPs）是一种性能稳定、无毒、磁性强、制备相对简单而且生物相容性较好的磁性材料，体内外及临床实验均提示Fe3O4-MNPs对机体无明显毒性，有较好的生物相容性。本课题旨在研究比较不同浓度的Fe3O4-MNPs能否对正常小鼠的免疫功能产生影响，为Fe3O4-MNPs作药物载体临床免疫应用提供理论依据。
方法在一次性经小鼠尾静脉给药72小时后及灌胃14天后处死小鼠进行检测。（1）分别称取小鼠的脾脏和体重，计算脾脏系数，明确Fe3O4-MNPs对免疫器官的影响。（2）采用甲基四唑蓝法（MTT）法检测刀豆球蛋白（ConA）诱导下小鼠脾淋巴细胞增殖情况，了解不同浓度尾Fe3O4-MNPs对免疫细胞增殖的作用。（3）采用中性红比色法（NaturalRed assay，NR）检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，测定巨噬细胞活性明确Fe3O4-MNPs对非特异性免疫的作用。（4）通过流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）检测小鼠外周血CD3+CD4+，CD3+CD8+细胞比例，分析Fe3O4-MNPs对小鼠T细胞亚群分化是否发生影响，有无影响到CD4+/CD8+比例。（5）使用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbentassay，ELISA）检测小鼠外周血与辅助T细胞（T helper cell，Th）分泌相关的细胞因子白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、IL-4、IL-10和γ干扰素（interferon-γ，IFN-γ），了解Fe3O4-MNPs在细胞因子分泌方面的作用。
结果（1）经尾静脉及灌胃给药后各Fe3O4-MNPs组小鼠的脾脏质量及脾脏/质量比与生理盐水对照组相比并未表现出明显的差异（p>0.05）。（2）尾静脉给药组在5.14m/kgFe3O4-MNPs给药情况下对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用（p<0.05），但在高浓度51.4mg/kgFe3O4-MNPs会导致抑制。灌胃给药时300mg/kg，600mg/kg和1200mg/kg各组均表现出对淋巴细胞增殖的促进作用，且以中剂量组作用最为显著（p<0.05）。（3）经灌胃给药时，600mg/kgFe3O4-MNPs时小鼠腹腔巨噬细胞的活力明显强于其他两个给药组（p<0.05）。（4）流式检测T淋巴细胞亚群时，与对照组相比，各浓度组的Fe3O4-MNPs均可以提高小鼠正常机体的CD4+细胞百分率（p<0.05），且随着Fe3O4-MNPs浓度的升高，Fe3O4-MNPs对CD8+细胞逐渐表现出抑制。（4）ELISA检测结果显示，在5.14mg/kgFe3O4-MNPs给药组IL-2、IL-10和。IFN-γ的分泌均较对照组不同程度增高（p<0.05），但IL-4的分泌未表现出明显的统计学差异。
结论（1）不同浓度的Fe3O4-MNPs对机体的免疫系统均有一定影响，随着浓度和给药方式的不同，表现不同。（2）适当浓度Fe3O4-MNPs对ConA刺激的脾淋巴细胞具有活化作用。（3）Fe3O4-MNPs对机体非特异性免疫功能的调节作用可能是通过增强巨噬细胞活性来产生的。（4）各浓度组的Fe3O4-MNPs均可以提高小鼠正常机体的CD4+细胞百分率，且随着Fe3O4-MNPs浓度的升高，Fe3O4-MNPs对CD8+细胞逐渐表现出抑制。提示Fe3O4-MNPs可增强机体的免疫应答反应。（5）Fe3O4-MNPs可以对小鼠细胞因子IFN-γ，IL-2，IL-10的分泌产生影响，进而可能影响到Th1/Th2的比例。