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目的:
观察高糖对人脐静脉内皮细胞TLR4表达的影响,比较加用脂多糖培养下不同浓度的高糖对人脐静脉内皮细胞TLR4表达水平变化。
方法:
体外培养人脐静脉内皮细胞株,分对照组(5mmol/L GS)、高糖组(10mmol/L GS、20mmol/L GS、40mmol/L GS)、高糖+LPS组(10mmol/L GS、20mmol/L GS、40mmol/LGS/+100ng/L LPS),培养24h后,用ELISA法检测各组上清IL-6水平,实时定量PCR检测各组细胞TLR4及MyD88基因表达水平。
结果：
1.高糖培养能促使人脐静脉内皮细胞产生IL-6水平增加,具有统计学意义(P＜0.05),在LPS诱导下高糖能进一步促使该细胞产生IL-6水平水平,具有统计学意义(P＜0.05)。
2.随着葡萄糖浓度增高,从5mmol/L到20mmol/L,人脐静脉内皮细胞产生的IL-6逐渐增多,具有统计学意义(P＜0.05),但再增高糖浓度(到40mmol/L),该细胞产生IL-6水平不再继续增加(P＞0.05)。
3.在LPS存在的前提下,高糖能诱导人脐静脉内皮细胞TLR4和MyD88基因表达增加,具有统计学意义(P＜0.05),但仅高糖培养对该细胞TLR4和MyD88基因表达无影响(P＞0.05)。
结论：
LPS作为TLR4配体,与TLR4结合后能激活MyD88依赖通路,刺激炎症反应,促进炎症因子IL-6产生增多；高糖能刺激人脐静脉内皮细胞炎症反应,使炎症因子IL-6产生增多,但对TLR4和MyD88表达无明显增高；而高糖合用LPS培养能诱导人脐静脉内皮细胞TLR4和MyD88表达上调,说明高糖在LPS存在前提下可能激发TLR4信号通路。