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目的:观察芪莲合剂治疗肺脾气虚型IIIB或IV期非小细胞肺癌(No-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)患者的临床疗效及对肿瘤相关因子的影响;利用体外细胞实验,探究芪莲合剂中主要作用成分之一黄芪甲苷(Astragaloside,As-IV)对人A549肺腺癌细胞的抑制作用,为黄芪甲苷推向临床应用提供新的思路和实验依据。
方法:1.临床研究:收集2018年7月至2019年7月就诊的符合纳入标准的肺脾气虚型晚期NSCLC患者70例,随机分为对照组与实验组,每组各35例。实验组患者采用芪莲合剂(Qilian Mixture,QLM)联合含铂化疗方案4周期(每21天为一个周期)进行治疗;对照组进行单纯化疗。分别评价并记录两组患者治疗前后中医证候积分、卡氏评分(Karnofsky,KPS,百分法);检测并记录两组患者治疗前后血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(Matrix Metalloproteinas-9,MMP-9);复查胸部强化CT评价治疗后实体瘤目标病灶近期疗效;同时对比两组患者用药期间不良反应发生率。
2.细胞实验:选用人A549细胞株作为实验对象,合适条件下对细胞进行一般培养后进行细胞实验。进行CCK-8细胞增殖实验探索黄芪甲苷合适作用浓度;随后将细胞随机分为对照组(Control Group,CG)、黄芪甲苷低剂量组(Astragaloside Low Dose Group,AS-L)、黄芪甲苷中剂量组(Astragaloside Middle Dose Group,AS-M)、黄芪甲苷高剂量组(Astragaloside High Dose Group,AS-H),各组分别应用黄芪甲苷浓度为0μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L培养基进行划痕实验、平板克隆实验,流式细胞仪检测细胞凋亡,观察不同剂量与不同作用时间下黄芪甲苷对A549细胞增殖、迁移、凋亡的影响。
结果:1.临床研究显示:经4个周期治疗后,8名患者剔除本研究(实验组5例,对照组3例);两组患者(实验组30人,对照组32人)一般临床基线资料均具有可比性(P>0.05);两组经治疗后,实验组在改善患者咳嗽咳痰、喘息少气、神疲乏力、腹泻便溏、自汗单症状积分及中医证候总积分上优于对照组(P<0.05);实验组在提高患者KPS评分方面优于对照组(P<0.05);两组对于实体瘤疗效差异不大(P>0.05);实验组降低血清VEGF、MMP-2、MMP-9水平优于对照组(P<0.05);与对照组相比,实验组可显著降低药物不良反应(骨髓抑制、胃肠道反应)发生率(P<0.05)。
2.细胞实验显示:与对照组相比,CCK-8细胞增殖实验结果表明芪莲合剂主要作用成分之一的黄芪甲苷可抑制A549肺腺癌细胞的增殖,且与作用时间、浓度呈正相关;划痕实验、克隆形成实验结果显示黄芪甲苷可抑制A549细胞的迁移、克隆,且呈浓度依赖性;细胞凋亡实验显示黄芪甲苷可促进A549细胞凋亡,且呈浓度依赖性,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。
结论:1.芪莲合剂联合含铂化疗方案,可有效改善肺脾气虚型晚期NSCLC癌患者的部分症状及指征,减轻化疗副作用。联合治疗虽在缩小肿瘤体积方面与传统化疗差异不大,但对于提升患者生活质量、提升化疗耐受性方面具有重要意义。
2.芪莲合剂的主要作用成分之一黄芪甲苷,具有抑制人A549肺腺癌细胞增殖、克隆、迁移,并促进其凋亡的作用。
方法:1.临床研究:收集2018年7月至2019年7月就诊的符合纳入标准的肺脾气虚型晚期NSCLC患者70例,随机分为对照组与实验组,每组各35例。实验组患者采用芪莲合剂(Qilian Mixture,QLM)联合含铂化疗方案4周期(每21天为一个周期)进行治疗;对照组进行单纯化疗。分别评价并记录两组患者治疗前后中医证候积分、卡氏评分(Karnofsky,KPS,百分法);检测并记录两组患者治疗前后血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(Matrix Metalloproteinas-9,MMP-9);复查胸部强化CT评价治疗后实体瘤目标病灶近期疗效;同时对比两组患者用药期间不良反应发生率。
2.细胞实验:选用人A549细胞株作为实验对象,合适条件下对细胞进行一般培养后进行细胞实验。进行CCK-8细胞增殖实验探索黄芪甲苷合适作用浓度;随后将细胞随机分为对照组(Control Group,CG)、黄芪甲苷低剂量组(Astragaloside Low Dose Group,AS-L)、黄芪甲苷中剂量组(Astragaloside Middle Dose Group,AS-M)、黄芪甲苷高剂量组(Astragaloside High Dose Group,AS-H),各组分别应用黄芪甲苷浓度为0μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L培养基进行划痕实验、平板克隆实验,流式细胞仪检测细胞凋亡,观察不同剂量与不同作用时间下黄芪甲苷对A549细胞增殖、迁移、凋亡的影响。
结果:1.临床研究显示:经4个周期治疗后,8名患者剔除本研究(实验组5例,对照组3例);两组患者(实验组30人,对照组32人)一般临床基线资料均具有可比性(P>0.05);两组经治疗后,实验组在改善患者咳嗽咳痰、喘息少气、神疲乏力、腹泻便溏、自汗单症状积分及中医证候总积分上优于对照组(P<0.05);实验组在提高患者KPS评分方面优于对照组(P<0.05);两组对于实体瘤疗效差异不大(P>0.05);实验组降低血清VEGF、MMP-2、MMP-9水平优于对照组(P<0.05);与对照组相比,实验组可显著降低药物不良反应(骨髓抑制、胃肠道反应)发生率(P<0.05)。
2.细胞实验显示:与对照组相比,CCK-8细胞增殖实验结果表明芪莲合剂主要作用成分之一的黄芪甲苷可抑制A549肺腺癌细胞的增殖,且与作用时间、浓度呈正相关;划痕实验、克隆形成实验结果显示黄芪甲苷可抑制A549细胞的迁移、克隆,且呈浓度依赖性;细胞凋亡实验显示黄芪甲苷可促进A549细胞凋亡,且呈浓度依赖性,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。
结论:1.芪莲合剂联合含铂化疗方案,可有效改善肺脾气虚型晚期NSCLC癌患者的部分症状及指征,减轻化疗副作用。联合治疗虽在缩小肿瘤体积方面与传统化疗差异不大,但对于提升患者生活质量、提升化疗耐受性方面具有重要意义。
2.芪莲合剂的主要作用成分之一黄芪甲苷,具有抑制人A549肺腺癌细胞增殖、克隆、迁移,并促进其凋亡的作用。