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目的:利用经典寿命研究模式生物--秀丽隐杆线虫进行延寿药物筛选,并进一步从胰岛素/胰岛素样生长因子(Insulin/insulin-like growth factor-1,ⅡS)通路及高度保守的微小RNA(microRNAs)角度分析筛选出延寿药物的可能作用机制。 方法:(1)建立并比较秀丽隐杆线虫延寿药物筛选平台;(2)利用秀丽隐杆线虫液体培养模式评价6种药物的延寿作用;(3)分析黄芪多糖对野生型秀丽隐杆线虫年龄相关指标、饮食、自体荧光、高度保守microRNAs、ⅡS通路核心因子mRNA表达水平及突变体寿命的影响,探究其可能的延寿机制;(4)通过细胞及小鼠急、慢性毒性实验评价黄芪多糖的药物毒性。 结果:(1)培养基成分、食物量、自体受精稳定性及影响实验误差的相关因素等比较表明,液体培养更节省人力、固体培养中各影响因素更小;(2)野生型秀丽隐杆线虫液体药物筛选结果显示,枸杞多糖、黄芪多糖及银杏黄酮组线虫寿命分别显著延长18.61%,22.62%及20.00%;(3)固体培养基中,黄芪多糖(200μg/mL)可延长野生型秀丽隐杆线虫寿命20.75%;(4)黄芪多糖延长野生型秀丽隐杆线虫生命第2及第4阶段,对其饮食、各时期自体荧光强度、daf-2、daf-16mRNA及高度保守miR-1、miR-34及let-7表达水平无明显影响,而对miR-124表达有影响;黄芪多糖可分别延长daf-2及daf-16突变体秀丽隐杆线虫寿命达16.72%及8.70%;(5)黄芪多糖无细胞毒性,并对小鼠无急、慢性毒性。 结论:固体及液体培养模式均可用于秀丽隐杆线虫寿命研究,液体培养更适于药物筛选、固体培养更适于延寿机制研究;枸杞多糖、黄芪多糖、银杏黄酮可延长液体培养模式下野生型秀丽隐杆线虫寿命;黄芪多糖对野生型秀丽隐杆线虫有延寿作用,其作用可能部分依赖于IIS通路及miR-124。