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目的:本实验采用弓形虫感染BALB/c雌鼠,①观察染虫雌鼠的毒性反应,建立生殖毒性的小鼠模型;②染虫雌鼠排卵情况及卵母细胞染色体的变化;③染虫雌鼠性激素(FSH、LH、E2)水平的变化;④着床前受精卵的发育情况;⑤孕中期鼠染虫后胚胎的发育情况,探讨弓形虫对雌鼠生殖功能及胚胎发育的毒性作用。方法:(1)建立生殖毒性的小鼠模型:将BALB/c雌鼠(21±0.5g,9-10周)随机分为11组,每组10只:A组正常对照组(PBS)、染虫B组(腹腔注射经胰酶消化后的弓形虫速殖子25个/只/2组、50个/只/3组、100个/只/4组、200个/只/5组、400个/只/6组)和染虫C组(腹腔注射不经胰酶消化的弓形虫速殖子,设剂量、组数相同)。观察小鼠生存情况(20天)。(2)弓形虫对卵母细胞的影响:将BALB/c处女鼠随机分为:正常对照1组(PBS),染虫组(腹腔注射纯化的弓形虫速殖子:25个/只/2组、50个/只/3组、100个/只/4组、200个/只/5组),每组10只;染虫3天后超排,取卵母细胞计数、观察其染色体。(3)弓形虫对雌鼠性激素分泌的影响:设正常对照组(PBS)和染虫组(腹腔注射纯化的弓形虫速殖子200个/只),染虫6天后,摘眼球取血,分离血清,用放免法测定雌鼠在一个动情周期中FSH、LH的水平;并测定雌鼠妊娠前3天E2的水平。(4)弓形虫对受精卵发育的影响:将BALB/c鼠随机分为正常对照组(PBS)和染虫组(腹腔注射纯化的弓形虫速殖子:25个/只/2组、50个/只/3组、100个/只/4组、200个/只/5组),3天后超排、合笼、交配,次晨查阴栓,取各组受精鼠,再随机分3组,每组10只。观察妊娠前3天的受精卵、2-细胞胚、4-细胞胚、桑椹胚及未受精卵、1-细胞胚、延迟胚,退化胚的数量、比率,并取小鼠主要脏器作病理切片,观察其病理学变化。(5)弓形虫感染孕中期BALB/c鼠的胚胎毒性:将受精鼠随机分为阴性对照组(PBS,1组)、染虫组(2～5组)和环磷酰胺组(6组),每组10只,孕8天染虫(25个/只/2组、50个/只/3组、100个/只/4组、200个/只/5组),孕18天颈椎脱臼处死孕鼠,称雌鼠子宫、胎盘、胎鼠重量。观察胎鼠有无吸收胎、死胎,并计数,取出活胎,肉眼观察其外观、内脏、骨骼有无畸形。结果:(1)胰酶消化组的生存天数显著高于未消化组(P<0.01),且胰酶消化各组间均有差异(P<0.05);雌鼠染虫25个/只无毒性反应;染虫400个/只,毒性较大,实验中全部死亡,可视为致死量。且随着剂量的增加,生存时间缩短。(2)染虫组:25个/只/2组、50个/只/3组、100个/只/4组、200个/只/5组的卵母细胞回收数均低于正常对照1组(P<0.05),3～4组染色体畸变率均高于正常组,但无显著性差异