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目的:探讨Tribbles同源物3(TRB3)在不同的表达水平时对博莱霉素诱导的C57BL/6小鼠肺纤维化的影响机制。探讨外源性调控TRB3在Wnt/β-catenin信号通路中对博莱霉素诱导的C57BL/6小鼠肺纤维化的影响机制。方法:将60只C57小黑鼠随机分为5组,分别为单纯生理盐水组(Mock组)、单纯纤维化组(F组)、纤维化+空载腺病毒组(F+GFP组)、纤维化+TRB3过表达组(F+TRB3组)、纤维化+TRB3低表达组(F+sh-TRB3组),每组12只。将博莱霉素溶液缓慢滴入小鼠气管,构建肺纤维化模型;造模第2日,通过尾静脉为小鼠注射相应的腺病毒,单纯生理盐水组及单纯纤维化组注入等量的生理盐水。分别于造模后第7天、第14天、和第28天三个时间点将C57小鼠分批处死,收集实验用小鼠肺泡灌洗液和肺组织制作相应标本。进行实验小鼠不同时间点肺部炎症变化及纤维化程度判断:通过HE染色和Masson染色观察肺组织形态学变化并进行纤维化评分,羟脯氨酸测定明确胶原蛋白含量,对肺泡灌洗液进行染色观察;免疫组化检测小鼠肺组织TRB3、上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、Vimentin、Fibronectin、α-SMA和β-catenin蛋白的表达情况;用Westernblot的方法检测TRB3、上述EMT相关蛋白及β-catenin蛋白在各组肺组织中的表达;用RT-qPCR的方法从mRNA水平检测肺组织中TRB3、proCollaⅠ/Ⅲ的表达;ELISA检测各组肺组织Col1aⅠ/Ⅲ的含量。结果:成功构建了博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化模型。HE染色和Masson染色、纤维化评分、羟脯氨酸测定、BALF染色显示TRB3高水平表达使博莱霉素诱导的C57实验小鼠肺组织在相应时间点炎症表现及纤维化表现更为明显,TRB3低水平表达组结果相反。免疫组化结果显示:在TRB3过表达组中β-catenin蛋白和EMT相关蛋白vimentin、α-SMA、Fibronectin的阳性表达显著高于单纯纤维化组,而蛋白E-cadherin的阳性表达则相反。Westernblot检测显示:TRB3过表达使肺纤维化小鼠EMT相关蛋白Vimentin、Fibronectin、α-SMA及β-catenin蛋白表达增加、E-Cadherin表达减少,而TRB3表达下调组则结果相反。RT-qPCR检测提示在mRNA水平,TRB3过表达组proCollaⅠ/Ⅲ表达上调,TRB3低表达组则结果相反。ELISA检测显示:TRB3过表达使各组肺组织Col1aⅠ/Ⅲ的含量明显升高,TRB3表达下调组则结果相反。结论:TRB3表达变化可以影响EMT相关蛋白和胶原蛋白mRNA的表达,提示外源性调控TRB3的表达可能对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的EMT过程有影响,进而参与肺纤维化的形成。TRB3过表达使Wnt/β-catenin信号通路的关键蛋白β-catenin蛋白表达增加,提示TRB3可能通过Wnt/β-catenin信号通路参与博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的过程。