Barrett食管(BE)是指食管下段复层鳞状上皮被化生的单层柱状上皮所替代的一种病理现象，可伴肠化或无肠化，其中伴有特殊肠上皮化生者属于食管腺癌的癌前病变。Barrett食管患者进展为食管腺癌的机率是普通人群的30～50倍，80%的食管腺癌发生于BE。临床研究和流行病学调查表明，从20世纪70年代至今食管腺癌是发病率上升最快的肿瘤之一，在西方国家上升高达350%，其增长速度已趋于恶性肿瘤的首位，在我国，随着饮食结构的西化，Barrett食管及食管腺癌的发病率也呈逐年上升趋势。但目前BE的发病机制仍不清楚，越来越多学者认为BE细胞来源于干细胞更能解释BE细胞的分化，Wang等通过对p63基因缺失小鼠研究表明残余的胚胎干细胞是食管Barrett样化生细胞的前体。另国内外研究已经证实PI3K/Akt/mTOR信号转导通路的关键基因在胆汁反流诱导形成Barrett食管过程中表达明显上调，提示该信号通路参与了Barrett食管的发病过程。目的：本实验通过检测PI3K/Akt/mTOR信号转导通路中关键因子PI3K、Akt、p-mTOR，CyclinD1在不同月龄胎儿食管的表达水平，研究PI3K/Akt/mTOR信号转导通路与胎儿食管发育过程的关系，旨在探讨Barrett食管的发病机制，验证Barrett食管是先天性疾病的假说。方法：收集不同月龄正常胎儿食管（4月、5月、6月、7月各6例），HE染色后光镜下病理学检查组织结构后，应用免疫组织化学及Western-Blot方法检测PI3K、Akt、p-mTOR及CyclinD1在不同月龄胎儿食管的表达水平。结果：1免疫组化检测结果1.1不同月龄胎儿食管粘膜中PI3K蛋白的表达PI3K蛋白主要表达于细胞核，部分细胞浆也可见表达，在4月月龄胎儿食管为强阳性表达，在5～7月龄胎儿食管为弱阳性到阳性表达。PI3K蛋白表达随胎儿月龄的增加呈逐渐下降趋势。各组之间的平均光密度值的差异具有统计学意义(P＜0.05)。1.2不同月龄食管粘膜中Akt蛋白的表达Akt蛋白主要表达见于细胞核，部分细胞浆也可见表达，在4月月龄胎儿食管为强阳性表达，在5到7月月龄胎儿食管为弱阳性到阳性表达。Akt蛋白表达随胎儿月龄的增加呈逐渐下降趋势，各组之间的平均光密度值的差异具有统计学意义(P＜0.05)。1.3不同月龄食管粘膜中p-mTOR蛋白的表达p-mTOR蛋白主要表达见于细胞核，部分细胞浆也可见表达，在4月月龄胎儿食管为阳性表达，在5到7月月龄胎儿食管为阴性到弱阳性表达。p-mTOR蛋白表达随胎儿月龄的增加呈逐渐下降趋势，各组之间的平均光密度值的差异具有统计学意义(P＜0.05)。1.4不同月龄食管粘膜中CyclinD1蛋白的表达CyclinD1蛋白主要表达见于细胞浆，部分细胞核也可见表达，在4月月龄胎儿食管为阳性表达，在5到7月月龄胎儿食管为阴性到弱阳性表达。Akt蛋白表达随胎儿月龄的增加呈逐渐下降趋势，各组之间的平均光密度值的差异具有统计学意义(P＜0.05)。1.5各关键基因表达相关性分析：PI3K/Akt/mTOR信号转导通路中关键因子PI3K、Akt、p-mTOR，CyclinD1的相对表达量之间存在较好的相关性：Akt与PI3K(r=0.849, P＜0.05)、Akt与CyclinD1(r=0.846, P＜0.05)、Akt与p-mTOR(r=0.699, P＜0.05)、PI3K与CyclinD1(r=0.903, P＜0.05)、PI3K与p-mTOR(r=0.888, P＜0.05)、 CyclinD1与p-mTOR(r=0.852, P＜0.05)。2Western-Blot检测结果2.1不同月龄胎儿食管粘膜中PI3K蛋白的表达PI3K蛋白表达随胎儿月龄的增加呈下降趋势：4月的光密度比值与5月、6月、7月的光密度比值的差异具有统计学意义(P＜0.05)，而5月、6月、7月之间的光密度比值无统计学差异(P＞0.05)。2.2不同月龄食管粘膜中Akt蛋白的表达Akt蛋白表达随胎儿月龄的增加呈逐渐下降趋势：各组之间的光密度比值的差异具有统计学意义(P＜0.05)。2.3不同月龄食管粘膜中p-mTOR蛋白的表达p-mTOR蛋白表达随胎儿月龄的增加呈逐渐下降趋势：4月的光密度比值与7月的光密度比值的差异具有统计学意义(P＜0.05)，而4月、5月和6月之间的光密度比值无统计学差异(P＞0.05)，5月、6月和7月之间的光密度比值无统计学差异(P＞0.05)。2.4不同月龄食管粘膜中CyclinD1蛋白的表达CyclinD1蛋白表达随胎儿月龄的增加呈下降趋势：4月的光密度比值与5月、6月、7月的光密度比值的差异具有统计学意义(P＜0.05)，而5月、6月、7月之间的光密度比值无统计学差异(P＞0.05)。2.5各关键基因表达相关性分析：PI3K/Akt/mTOR信号转导通路中关键因子PI3K、Akt、p-mTOR，CyclinD1的相对表达量之间存在较好的相关性：Akt与PI3K(r=0.44, P＜0.05)、Akt与p-mTOR(r=0.406, P＜0.05)、PI3K与CyclinD1(r=0.251, P＜0.05)、PI3K与p-mTOR(r=0.351, P＜0.05)而以下蛋白表达量之间的相关性差：Akt与CyclinD1(r=0.306, P＞0.05)、CyclinD1与p-mTOR(r=0.221, P＞0.05)。结论：参与了Barrett食管的发病过程的PI3K/Akt/mTOR信号转导通路的各个关键基因在胎儿食管的表达随着月龄的增大均呈逐渐下降趋势，表明该信号转导通路可能与胎儿食管发育的分化与调亡过程存在着某种联系。提示Barrett食管可能是一种先天性疾病。