有机磷水解酶OPHC2在解脂耶氏酵母Polg中的分泌表达

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近些年来,有机磷农药的广泛使用为粮食增产做出了巨大的贡献,伴随而来的农药残留问题就无法避免。由于有机磷农药属于剧毒物质,它能够抑制神经系统中乙酰胆碱酯酶(AchEacetylcholine esterase)的活性,造成中毒者神经功能的丧失并最终死亡,所以研究降解农药残留的方法特别是生物降解法就显得十分重要。本研究成功实现了来源于类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)的有机磷水解酶的基因ophc2在解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica Polg)中的分泌表达,并采用镍柱亲和层析法对其进行纯化,酶学性质研究表明该重组酶的最适反应温度为65°,最适反应pH值为8.5,并具有良好的温度耐受和pH耐受。不仅如此,表达宿主解脂耶氏酵母被美国 FDA(Food and Drug Administration)认定为 GRAS(generally regarded as safe)微生物,所以,基因工程重组菌种所产生的发酵上清液可以直接用来降解残留在蔬菜和水果上的农药。
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