淡水藻的分离纯化与培养及藻体内生化成分的测定研究

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淡水藻的种类繁多,分布广泛,生长速度快,生物量大,由于其体内含有蛋白质,脂肪,碳水化合物,各种多不饱和脂肪酸,必需氨基酸和色素等化合物,同时还含有抗生素,毒素等生物活性物质而得到广泛的应用。已报道的应用研究集中在水生动物饵料,生物柴油,食物,医药保健品,化妆品和高分子材料等方面。由于石油能源的日益缺乏和水生动物饲料的限制性,目前藻类应用的研究重点在生物柴油和动物饲料两个方面。同类研究的藻源主要集中在海藻的研究上淡水藻的研究还比较少,同时由于湖北属于淡水湖泊较多的地区,因此本论文从湖北淡水区分离纯化出十种淡水藻,并对于纯化出的十种藻做了如下的研究:1.分离鉴定出十种淡水藻,通过制作生长曲线了解十种藻在培养基中的适应情况。结果发现这十种藻中有八种绿藻,两种硅藻,绿藻A为蛋白核小球藻;绿藻B为月牙藻;绿藻C为尖形栅藻;绿藻D为锯齿栅藻;绿藻E为小球藻;绿藻F为椭圆小球藻;绿藻G为柯氏并联藻;绿藻H为土生绿球藻。硅藻a为中型脆杆藻;硅藻b为钝脆杆藻披针形变种。从生长曲线了解到绿藻比较适合在SE培养基和相应培养条件下生长,而硅藻在该D1培养基中生长较为缓慢,同时根据生长速率的不同将其生长时期分为四个生长时期。2.测定十种淡水藻体内蛋白质,葡萄糖,脂肪和色素含量在四个时期的动态变化情况,结果发现蛋白质含量范围从(占干重百分比)1.91%到18.58%,葡萄糖含量范围从(占干重百分比)5.02%到49.91%,脂肪含量范围从(占干重百分比)2.86%到31.29%,色素含量范围从1.383 mg/L到9.567 mg/L,得出综合营养价值比较高的藻为绿藻A蛋白核小球藻,绿藻B月牙藻,绿藻F椭圆小球藻,绿藻G柯氏并联藻,硅藻a中型脆杆藻,硅藻b钝脆杆藻披针形变种。同时通过脂肪的比较,得出具有潜在生物柴油原料的藻类为硅藻b钝脆杆藻披针形变种。3.测定十种淡水藻四个时期的脂肪酸动态含量,结果发现绿藻的主要脂肪酸组成为多不饱和脂肪酸,而硅藻的主要脂肪酸组成为单不饱和脂肪酸。综合比较脂肪酸和蛋白,葡萄糖,脂肪和色素得出最佳可作为水产动物饵料的藻类及其投放时期,分别为绿藻B月牙藻,投放时期为第四时期生长静止期;绿藻F椭圆小球藻,投放期定为第四时期生长静止期;绿藻G柯氏并联藻,将第四时期生长静止期作为其的投料时期;绿藻H土生绿球藻,将第三时期指数期作为投料的最佳时期;硅藻a中型脆杆藻,投料期为第四时期生长静止期;硅藻b钝脆杆藻披针形变种,其投放期为第四时期生长静止期。4.测定作为饵料的六种藻的矿物质含量情况,发现元素Mg的含量范围为5.678~19.08 mg/g,Fe的含量范围为2.760~10.81 mg/g,Mn的含量范围为2.038~7.784 mg/g,K的含量范围为11.16~38.17mg/g,Ca的含量范围为1.590~7.161 mg/g,Zn的含量范围为0.1186~1.408 mg/g,Cu的含量范围为0.2522~1.525mg/g,Ni的含量范围为0.0024~0.025 mg/g,Pb的含量范围为0.004~0.008mg/g,Cr和Cd未检出。藻B,F,G,H,a,b,均含Mg,Fe,Ca,Mn,K较多,其中含常量及微量元素最多的藻是F,H。通过上述研究可以考虑将月牙藻,椭圆小球藻,柯氏并联藻,土生绿球藻,中型脆杆藻,钝脆杆藻披针形变种应用于水生动物养殖,继续后续的活体喂养应用试验,以得到营养价值较高的藻类缓解水产动物饲料品种缺乏的问题;同时对于含脂量高的硅藻钝脆杆藻披针形变种,可以通过培养条件、培养方式的改变或分子生物学技术再次提高其脂含量,然后通过将藻体提脂,皂化,甲酯化等一系列实验获得具有较高产率的生物柴油。
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