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本实验室2003年首次构建了可在板栗疫病菌中自主复制的穿梭质粒pGXH1130。本研究通过双酶切pGXH1130，用酶切产物自连后获得的变小的质粒转化板栗疫病菌EP713原生质体，并进行Southern杂交进一步鉴定变小的质粒是否依然具有穿梭以及自主复制的功能，逐步去除了pGXH1130上与自主复制以及穿梭无关的多余片段。将最终获得的不能继续缩小的质粒上的Trpc启动子和终止子置换为板栗疫病菌gpd启动子与终止子，并在gpd启动子与终止子之间添加了多克隆位点，将大小约为15.6kbp的pGXH1130优化为约8.9kbp大小的能在板栗疫病菌中自主复制的穿梭表达载体pFC9。pFC9以潮霉素抗性作为进行板栗疫病菌遗传转化的选择标记。Southern杂交分析表明pFC9可在板栗疫病菌细胞内自主复制。携带漆酶基因LAC-1 cDNA和基因组DNA的pFC9重组质粒都可以在板栗疫病菌低毒菌株EP713中高效表达出漆酶活性，表明pFC9可以在真菌宿主板栗疫病菌中高效表达目的基因。携带有pFC9的转化株EP713／pFC9-Lac1可以通过菌丝融合方式将潮霉素抗性传播给对潮霉素敏感的板栗疫病菌菌株EP155，表明该载体具有类似低毒病毒CHV1-EP713的在板栗疫病菌细胞质内运动的能力。穿梭表达载体pFC9的成功构建为板栗疫病菌的基因功能研究提供了一个崭新的工具。