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本文旨在研究从奶牛瘤胃内容物中筛选一株对大豆秸秆有分解作用的细菌、对该细菌进行镜检和PCR分子鉴定,并研究该菌株对体外瘤胃发酵、泌乳中期荷斯坦奶牛的泌乳量和乳品质等生产性能的影响,试验分为3个试验完成。试验一纤维分解菌的筛选、产酶条件的优化及菌株的鉴定。试验采用刚果红纤维筛选法,从瘤胃内容物中筛选一株对大豆秸秆有分解作用的目标菌株。首先用4头装有永久性瘤瘘管荷斯坦奶牛,以粉碎的大豆秸秆(包括豆秸、豆荚、少量的大豆)为粗饲料,共饲喂18d(预饲期15d,正式期3d),促进瘤胃里可分解大豆秸秆菌群生长。采用负压法取瘤胃内容物,过滤后接入富集培养基中,使细菌繁殖扩增；其次,采用刚果红筛选法进行初筛,筛选出分解纤维素的菌株,将初筛的菌株接入大豆秸秆培养基中复筛,最后根据复筛菌株纤维素酶活性最终确定一株对大豆秸秆纤维素有分解作用的菌株。菌株产酶条件的优化试验,分析结果为：37℃,培养60h,接种量10%、氮源NH4NO3添加量0.4%是该菌株最适宜的培养条件。该菌株在刚果红培养基上,呈白色透明状,表面光滑。制片染色显微镜观察结果是该菌株为革兰氏阴性无芽孢杆菌。对该菌株进行基因序列检测,采用PCR分子鉴定法,得到该菌株共有1509个碱基片段,AT/CG=695/814,这些碱基片段可编码503个氨基酸。综合以上结果将该菌株命名为SD菌(Soybean straw disassembled bacterium)。试验二SD菌对奶牛体外瘤胃发酵的影响。试验采用体外模拟瘤胃环境培养法。试验根据添加菌量分为：对照组(Ocfu/dL)、试验组1(0.75×109cfu/dL)和试验组2(1.5×109cfu/dL)三组。测定不同时间(Oh、2h、4h、8h、12h、24h、48h)的指标：产气量、pH值、氨态氮浓度(NH3-N)、挥发性脂肪酸浓度(VFA)、菌体蛋白浓度(BCP)、底物中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)。结果显示,试验组2瘤胃的各项指标的作用均比对照组好,说明SD菌对体外瘤胃发酵有一定促进作用。试验三SD菌对奶牛生产性能的影响。试验选用18头体重相近、体况良好、同一胎次、产奶量相近地泌乳中期荷斯坦奶牛,将其随机分为3组,每组6头奶牛。根据日粮中添加不同剂量的菌制剂共分为：对照组(Ocfu/dL)、试验组1(0.75×1011cfu/dL)和试验组2(1.5×1011cfu/dL)三组,预试期10d,正试期40d。记录每一天的泌乳量并测定试验期第1天、第20天、第40天的牛乳成分。结果显示,与对照组相比,饲喂SD菌40d后的产奶量由原来的20.88kg/d,试验组1升高至21.89kg/d、试验组2升高至22.45kg/d;4%标准乳由19.47kg/d,试验组1升高至20.73kg/d、试验组2升高至21.50kg/d,产奶量和标准乳均显著升高(P<0.05)。试验组2的乳蛋白率为3.54%、乳脂率为3.72%,与对照组的乳蛋白率3.33%和乳脂率3.59%均显著提高(P<0.05),各组之间的乳糖率、非脂乳固体物差异不显著(P>0.05)。综上所述,本试验筛选得到的SD菌对大豆秸秆的纤维素有分解作用,最适宜的产酶条件是：37℃、培养60h、接种量10%、氮源NH3NO3添加量0.4%。并对其进行PCR分子鉴定和镜检,将其命名为SD菌。这种细菌对体外瘤胃内环境稳态有一定的促进作用,可以提高奶牛泌乳量和乳品质。