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本文以猴头菇子实体为原料,采用微波辅助提取-絮凝纯化技术集成分离猴头菇子实体总多糖,得到了最佳的提取分离工艺条件,并对猴头菇子实体总多糖的体外抗氧化活性进行了初步评价。 首先对微波辅助提取猴头菇多糖的工艺进行考察,以总多糖得率为考察指标,通过单因素试验,得到初步优化的工艺条件。然后在单因素试验基础上,筛选关键影响因素,进行Box-Behnken设计试验,并建立二次回归模型,最终得出最优工艺参数:液固比为23.7mL/g,粒径大小选取20~40目,微波辅助时间228.6s,溶剂pH5,提取1次,此时,总多糖得率为8.91%。最后,将优化工艺与传统提取方法对比,其中微波提取法的得率是传统热水提取法得率的1.74倍、索氏提取法的1.79倍,且用时少、能耗低,是一种经济高效的提取方法。 以脱蛋白率和多糖保留率为指标,研究ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂和壳聚糖絮凝剂絮凝纯化猴头菇总多糖工艺,得到的最佳参数为: (1)使用ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂:组份B的加入量为1.5mL/g,组份B与组份A的用量比为1∶0.4,絮凝温度为50℃,絮凝时间2h,提取液浓缩比1∶10,在该条件下脱蛋白率为32.75%,总多糖的保留率为95.26%; (2)使用壳聚糖絮凝剂:絮凝温度为60℃,絮凝剂用量为1.0mL/g,絮凝作用时间为2.5h,提取液浓缩比1∶10,pH为4,此时脱蛋白率35.23%,总多糖的保留率可达91.51%。 最后,对比了微波辅助提取-壳聚糖絮凝纯化工艺下获得的猴头菇子实体总多糖(HEP1)和水提醇沉工艺下获得的猴头菇子实体总多糖(HEP2)的抑制氧化活性,在0.1~1.0mg/mL浓度范围内,HEP1对DPPH·、·OH、O2-·的最大清除率分别高达78%、61%、41%左右,同时,HEP1和HEP2的还原力存在一定差异,但总体相差不大,可以用于潜在的天然抑制氧化活性物质的开发。