论文部分内容阅读
随着社会经济与科学技术的快速进步,人们对生活品质的需求也愈来愈高,比如食用性油脂的耗量也相应增加。目前,废弃油脂的处理方法主要有物理法、化学法、物理化学法及生物法。生物法是指通过微生物代谢途径降解油脂,不仅对环境无污染,而且可以产生生物表面活性剂、脂肪酶等具有工业应用价值的副产物。通过使用经修饰后的末端荧光标记限制性酶切片段长度多态性(mT-RFLP)分析方法,我们从舟山海域石油污泥中筛选出一株可利用橄榄油生产生物表面活性剂的ZS6菌株。在克服了通用引物27F对该菌株16S rDNA扩增的非特异性后,确定了 ZS6菌株属沙雷氏菌属。酸解后茚三酮显色分析表明,ZS6产生的表面活性剂属环脂肽类生物表面活性剂,对甲苯有很好的乳化效果,E24达100%。平板免疫共沉淀结果显示此表面活性剂属非离子型,拟是类似沙雷氏菌属产生的湿化剂。利用粗提物测得CMC值为19.35 g/L,ZS6粗提物产量估计可达70 g/L。Serratia sp.ZS6对橄榄油具有较强的降解消化能力,经过64h培养后,降解率可以达到90%。以pNPB为底物,测得酶活性达58000U/L。通过凝胶原位脂肪酶活性分析与NanoLC-ESI-MS/MS等分析,得知ZS6所产生的脂肪酶氨基酸序列及其编码基因序列。通过蛋白序列比对分析,确认ZS6脂肪酶属于水解酶第一家族第三亚家族。通过酶学活性分析发现,ZS6脂肪酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0-8.0,Ca2+、甲醇对其活性具有显著激活作用,盐浓度为120g/L时,活性最高,此盐浓度比海水盐度要高出3.4倍。综上所述,本工作结果表明,一株油污中分离出的Serratia sp.ZS6菌株可产环脂肽类生物表面活性剂和水解酶第一族第三亚族类脂肪酶,本研究为废弃油脂污水处理和生物柴油生产奠定基础,并为可持续发展提供依据。