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目的:研究A1腺苷受体在芍药苷抑制脓毒症小鼠心功能障碍中的作用机制方法:1.采用SPF级体重在30-35g之间的雄性昆明小鼠,使用经典的盲肠结扎穿孔术(CLP)复制小鼠脓毒症模型并延用前期实验探索的合适的Pae(20 mg/kg,0.1 ml/10 g)和DPCPX(特异性A1腺苷受体阻断剂,1 mg/kg)剂量。小鼠随机分为8组,分别为:A:CLP+DMSO(以50%的二甲基亚砜作为DPCPX的药物溶剂)+H2O;B:CLP+DMSO+Pae;C:CLP+DPCPX+H2O;D:CLP+DPCPX+Pae;E:Sham+DMSO+H2O;F:Sham+DMSO+Pae;G:Sham+DPCPX+H2O;H:Sham+DPCPX+Pae。2.造模术后12 h切取心脏组织经固定、脱水、包埋、切片、HE染色后制成玻片标本,于荧光显微镜下直接观察、并摄片,观察小鼠心肌组织的形态学改变。3.造模术后6 h经眼球摘除采血法采集全血,收集血清样品;立即处死后留取心脏组织制成心肌匀浆提取液。运用Luminex x MAP技术检测各组小鼠血清及心肌中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6),白介素-12(IL-12),白介素-10(IL-10),干扰素-γ(IFN-γ)的水平,观察Pae和DPCPX对脓毒症小鼠血清及心肌组织中的细胞因子的影响。4.造模术后6 h的小鼠心脏组织,研磨成匀浆后提取上清液,Western blot方法测定各组脓毒症小鼠心脏组织匀浆上清液中P38,ERK,JNK的磷酸化与非磷酸化蛋白以及Bcl-2的表达水平,研究腺苷A1受体在芍药苷抑制脓毒症小鼠细胞因子和心肌损伤或凋亡中的保护作用机制。结果:1.在荧光显微镜下可见CLP各模型组均可见心肌细胞水肿,心肌纤维排列紊乱、横纹欠清晰;其中芍药苷治疗组小鼠心肌的病理改变较CLP模型组明显减轻;抑制剂组、芍药苷与抑制剂合用组小鼠的组织水肿、心肌纤维紊乱则比模型组明显加重;假手术各组小鼠则呈现正常组织学形态。2.脓毒症小鼠CLP组心肌组织中促炎因子TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-12,IFN-γ及抗炎因子IL-10的浓度明显高于Sham各组(P<0.05),各Sham组间无统计学差异(P>0.05)。其中,各促炎因子的CLP+DMSO+Pae组低于CLP+DMSO+H2O组、CLP+DPCPX+H2O组高于CLP+DMSO+H2O组、CLP+DPCPX+Pae组高于CLP+DMSO+Pae组(P<0.05)。抗炎因子IL-10则相反。3.Western blot法测定显示,P38,ERK,JNK的磷酸化水平明显高于Sham各组(P<0.05),Sham组间无统计学差异(P>0.05)。其中,CLP+DMSO+Pae组低于CLP+DMSO+H2O组、CLP+DPCPX+H2O组高于CLP+DMSO+H2O组、CLP+DPCPX+Pae组高于CLP+DMSO+Pae组(P<0.05)。Bcl-2的表达水平则相反。结论:芍药苷通过调节脓毒症小鼠血清及心肌组织中炎症因子发挥其抑制脓毒症小鼠心功能障碍、减轻小鼠心肌损伤的作用,其机制与调节MAPKs信号通路的活化,并通过调节Bcl-2蛋白表达抑制心肌细胞凋亡有密切联系,该保护作用在应用腺苷A1受体抑制剂DPCPX后被阻断,说明芍药苷可以通过腺苷A1受体发挥其心肌保护作用。