黑芝麻中抗菌蛋白的分离纯化及其主要性质

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许多植物都具有内源组成型表达的抗菌蛋白。这些抗菌蛋白不但有强的抗菌活性,而且抗菌谱广,在植物病害防治中越来越受重视。首先这些抗菌蛋白纯化之后可以直接用做“生化试剂”,其次可以通过测定抗菌蛋白的序列从而在原植物中克隆出其基因,这是在植物抗病基因工程中抗病基因的一个重要来源。由于这些抗菌蛋白都源于植物内源表达的基因,所以从转基因植物安全性的角度上考虑更易于被群众接受、消除他们对转基因食物的疑虑心理。 本实验利用低压Bio-Rad ECONO层析系统、BIO-CAD高压液相层析系统,通过Fastflow Q阴离子柱层析和POROS Q 20阴离子柱层析及分子排阻层析从黑芝麻中提取出了一种对多种真菌有很强抗性的抗菌蛋白,该蛋白对不同真菌抑制的IC50因不同真菌而有所不同,初步检测对菜豆枯萎有强的抗性,其IC50要小于28μg/ml;对棉花炭疽、木霉也有显著活性,但IC50明显增大;不抗棉花黄萎和小麦赤霉菌。该蛋白在聚丙烯酰胺凝胶电泳中表现单一条带,分子量约为31KD。进一步实验发现此蛋白对蛋白酶K有抗性,但不耐高温,加热后其抑菌活性丧失很快。 从黑芝麻中提取内源表达的高效、广谱抗菌蛋白的工作国内、外刊物中尚未见报导。关于该蛋白的一些其它特性尚有待于进一步研究以其了解其抗菌机理,从而更好地利用它为人类服务。
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