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目的:以人类非小细胞肺癌为研究对象,检测CAR在EGFR突变型和EGFR野生型样本中的表达情况,比较二者间的差异,着重探讨EGFR基因突变与CAR在肿瘤发生发展过程中的关系。分析EGFR-TKIs治疗EGFR突变型NSCLC的可能机理,为EGFR-TKIs与腺病毒载体共同应用治疗肿瘤提供理论依据。方法:收集新鲜非小细胞肺癌手术标本300例及其对应的正常肺组织(距离瘤组织5cm以上距离的肺组织)。标本收集严格按照无菌操作,收集的标本马上放入液氮中,-80℃保存,同时收集所有患者资料,将完整资料存放待最后分析实验结果。首先应用实时荧光定量PCR技术检测EGFR exon19和exon21突变状态,然后随机选取50例为突变组和50例野生组:分别用免疫组织化学和western blot检测pEGFR、CAR蛋白的表达情况;分析CAR在EGFR突变型和EGFR野生型样本中的表达情况,探讨二者相互关系和作用。结果:1.EGFR基因突变状态突变型例数为102例,野生型者为198例;集中表现在外显子19和21突变。其中外显子19突变型者为66例,外显子21突变者为36例。2. CAR、pEGFR蛋白的表达情况:随机选取50例突变型和50例野生型分为两组,免疫组织化学结果显示:48例(48%)CAR蛋白的表达阳性,其中EGFR突变型者中34例(68%)表达CAR,野生型者中14例(28%)表达CAR。52例p-EGFR蛋白的表达阳性,EGFR突变型者中40例(80%)p-EGFR阳性,野生型者12例(24%)阳性。Western blot方法检测CAR在EGFR突变型和EGFR野生型肺癌组织表达量分别为1.220±0.269,0.891±0.144,pEGFR蛋白在EGFR突变型和EGFR野生型肺癌组织表达量分别1.165±0.206,0.922±0.125,CAR和pEGFR蛋白表达差异在EGFR突变型和EGFR野生型肺癌组织间有统计学差异(P<0.05),且在各组间均有统计学意义。3.CAR蛋白和pEGFR蛋白的表达与EFGR基因突变具有相关性,EGFR突变的NSCLC中CAR和pEGFR高表达,其差异具有统计学意义P<0.05。CAR蛋白和pEGFR蛋白的表达与EFGR基因突变类型不相关,P>0.05.4.CAR蛋白和pEGFR蛋白在EGFR突变型和野生型肺癌组织中表达的具有相关性二者表达呈显著正相关(r=0.448,P=0.026)。结论:1.基因突变与p-EGFR表达:EGFR突变集中表现在外显子19和21,其中外显子19突变型者多于外显子21突变者。EGFR基因突变在肺腺癌中发生率较高,外显子19的突变率高于外显子21的突变率。EGFR基因突变在女性非吸烟患者中腺癌高,与性别、吸烟史和病理类型有关。2.应用IHC和Western blot两种方法检测CAR和pEGFR在EGFR突变型和野生型非小细胞肺癌患者中的表达,这二者表达不同,即CAR和EGFR蛋白在EGFR突变型和EGFR野生型非小细胞肺癌组织间表达不同。3.EGFR基因突变与p-EGFR表达、CAR表达之间的关系:非小细胞肺癌中CAR的表达与p-EGFR表达呈正相关,并与EGFR基因突变呈正相关性,但与基因突变类型不相关。4.如果CAR表达与EGFR基因突变共同作用于肺癌的形成机制,那么拮抗CAR的抗体有望成为辅助EGFR-TKI的靶向治疗药物。若然不是肺癌形成的促进因子,则肺癌组织中CAR的高表达则有利于腺病毒介导的基因治疗,为EGFR-TKIs与腺病毒载体共同应用治疗肿瘤提供理论依据。