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茶油是从油茶种子中制备的高品质食用植物油,因其富含不饱和脂肪酸及独特风味而享誉世界,被誉为“东方橄榄油”。茶油中含有茶多酚、油茶皂苷、角鲨烯和留醇等多种微量活性物质,对人体健康十分有益。因其具有一定的防晒、抗氧化等功效,茶油也作为基础油用于化妆品、个人洗护领域。然而,价格较高及供不应求状况也导致全国各地频频出现大规模的茶油掺假现象。目前,国内外学者通过色谱法、光谱法、质谱法、核磁共振、电化学等单一或联用方法,结合化学计量法对食用植物油脂掺假进行了较多研究。目前,食用植物油脂的掺假鉴定技术主要基于脂肪酸组成及含量,但易受原材料的产地、品种、气候环境、采收方式、储存条件等影响而发生较大变化,甚至可通过使用多种原料调配制成脂肪酸组分比例接近茶油自身的掺假产品,因而仅通过脂肪酸组成及含量测定难以准确鉴定茶油掺假情况。基于特征DNA的掺假鉴定技术可以根据不同物种具有的不同基因型对物种进行鉴定,可以有效避免理化方法带来的困扰。基于此,本论文拟开展基于特征DNA的茶油掺假鉴定技术研究,获得的主要结果如下。1.通过气相色谱法测定了主要食用植物油的组分及含量,并以此为基础,发现了多种潜在的茶油掺假组合。2.建立茶油高质量DNA提取方法。通过比较改良CTAB法、二次CTAB法和改良SDS法,改良SDS法因其操作简便、操作环节少、试剂毒性低、提取成本低、提取时间短、提取效果较好等优势被确定为茶油高质量DNA的提取方法。3.油茶特征DNA的特异扩增引物设计与筛选。在设计出的115对待选油茶特征DNA特异扩增引物中,12对油茶特征DNA对全部5个茶油DNA样品产生唯一的特异性电泳条带,且与油茶叶基因组DNA样品产生的特异性电泳条带位置一致。4.油茶特征DNA候选特异性引物的排他性筛选。通过与油棕、油菜、油橄榄、大豆、花生、玉米、葵花籽等7种常见的油料植物基因组DNA反应,3对油茶特征DNA候选特异性引物没有产生特异性反应,分别是124、142和1214号引物。5.建立茶油DNA荧光定量PCR体系,获得模拟茶油掺假的回归曲线,形成基于油茶特征DNA的茶油掺假鉴定技术体系。以通过排他性筛选得到的1214号引物为基础,设计得到荧光定量PCR引物1214L/1214R和TaqMan探针1214P,并建立荧光定量PCR体系。通过模拟茶油掺假,获得了茶油-大豆油、茶油-玉米油、茶油-花生油的模拟掺假线性回归曲线,形成基于特征DNA的茶油掺假鉴定技术体系。本论文通过茶油潜在掺假方式、油茶特征DNA筛选,特征DNA引物设计与筛选,茶油DNA提取方法比较,荧光定量PCR体系建立,模拟掺假模型建立等方面建立了完整的基于油茶特征DNA的茶油掺假鉴定技术体系,为茶油掺假鉴定提供一种新的思路与方法。