川产道地药材叠鞘石斛(Dendrobium denneanum)品质评价方法研究

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石斛为我国传统名贵中药材,生药来源为兰科(Orchidaceae)石斛属多种植物的新鲜或干燥茎的统称。历代本草均有记载,其主要功效为:味甘,性微寒,归胃、肾经,具有滋阴清热、益胃生津的功效。现代中药药理学研究表明,石斛具有抗肿瘤,防治白内障,保护胃肠道,抗衰老,调节机体免疫力,调节血糖等作用。中药的品质是中药的生命,它是临床疗效的基本保证。但是,缺乏符合中医药特色的、与国际标准接轨的中药品质评价标准,已经成为中药现代化、国际化进程中的瓶颈问题。解决中药品质及质量的标准化、稳定性和可控性的问题,提供安全、有效、稳定、可控的优质中药材以保证临床疗效是摆在中医药事业发展面前重要而迫切的任务。本研究主要内容包括:  ⑴叠鞘石斛(Dendrobium denneanum)为川产道地药材,也是商品石斛中的主流品种之一。近年来关于石斛品质评价的研究多集中于药典收载的几种石斛品种,而对叠鞘石斛(D.denneanum)这一主流品种展开的相关研究却甚少。本文以产于四川夹江的川产道地药材叠鞘石斛为研究对象,在中医药理论指导下,以药效组分为研究对象,借鉴中药化学及计算机辅助技术的方法初步探讨符合中医药特色、与国际标准接轨的叠鞘石斛药材综合品质评价方法。叠鞘石斛生药鉴定研究:采用传统的粉末显微鉴定法、粉末荧光显微鉴定法、基于反映药材整体化学成分特征的红外光谱结合化学计量学鉴定法共3种方法对叠鞘石斛的生药进行鉴定。结果表明,传统的粉末显微鉴定法不易将叠鞘石斛从其他石斛属植物中鉴别出来;粉末荧光显微鉴定法则依据不同的石斛品种含有不同的化学成分因而呈现不同的荧光特性而能将叠鞘石斛与其它不同的石斛品种鉴别开:红外光谱结合化学计量学鉴定法相比于以上2种方法在鉴定叠鞘石斛生药原粉及其提取物方面具有明显的优势,能够准确,便捷的鉴定叠鞘石斛。  ⑵叠鞘石斛道地产区评价研究。文献调研结合道地产区实地考察,分析了道地产区立地条件、栽培条件、生药形态品质、道地产区加工方法。立地条件方面分析了道地产区生态地理学特征,初步揭示其与道地性形成的关系。栽培条件方面调查了道地产区的栽培技术和农艺措施。生药形态品质方面研究了药材的“形、色、气、味”等性状特征,作为道地药材传统品质的一种表征形式。传统加工方法方面调查了传统采收时间、方法、产地加工炮制等加工品质特征。  ⑶叠鞘石斛化学成分(药效物质基础)品质评价研究。以药效组分理论为指导,分析了多糖组分的含量、分子量表征、清除DPPH自由基活性;分析了生物碱组分的含量、HPLC-UV指纹图谱;分析了联苄及香豆素类化合物的含量;分析了游离氨基酸组分的种类及含量;分析了金属元素组分的种类及含量;建立了叠鞘石斛乙醇提取物的HPLC-UV、HPLC-MS指纹图谱方法并借以表征药材的整体化学成分特征。运用以上评价药效组分的方法对不同生长年限、不同炮制工艺、不同品系、不同产地、不同药用部位的材料进行了化学品质分析,结果表明,所建立的评价叠鞘石斛药效组分的综合方法可以评价该药材的化学品质优劣。  ⑷不同石斛种之间化学成分相似性研究。研究了基于药材红外光谱及HPLC-UV指纹图谱的叠鞘石斛与其他石斛品种之间的化学成分相似性,为寻找优质石斛品种的替代资源提供科学依据。结果表明,叠鞘石斛与传统认为的质优石斛品种鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum)具有较高的化学成分相似性,在一定程度上可以作为它的替代资源综合开发利用。  ⑸叠鞘石斛虚拟药效学研究。基于计算机虚拟筛选技术初步研究了叠鞘石斛所含化学成分(药效物质基础)的虚拟药效学。结果表明,叠鞘石斛所含化合成分的虚拟药效学结果与其传统的功效相一致,且为多成分、多靶点的综合作用模式;虚拟筛选技术完全可以用于药材所含药效物质基础的药效品质评价研究。该方法的建立为中药石斛的药效学评价提供了一种简便、准确、可靠的评价方法。
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