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目的:研究糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)和脑衰反应调节蛋白2(Collapsin response mediator protein 2,CRMP-2)在形觉剥夺性弱视大鼠视皮层中的表达,探索其在弱视发病机制中的意义。方法:1.出生14天的健康大鼠64只,随机选择32只大鼠行单侧眼睑缝合术作形觉剥夺性弱视组,另外32只大鼠不做任何处理成为正常组。根据大鼠出生的天数,在21天时将形觉剥夺性弱视组和正常组大鼠用10%水合氯醛麻醉后行P-VEP(Pattern Visual Evoked Potential)检测,记录P100波的潜伏期和波幅值,判断单眼形觉剥夺性弱视模型是否建立成功。2.根据大鼠出生的天数,分别在14天、21天、45天、120天4个时间点处死形觉剥夺性弱视组和正常组大鼠,每小个时间点处死大鼠各8只。所有处死的大鼠均取其大脑视皮层组织,用4%多聚甲醛PBS溶液固定后,封蜡行组织切片。采用HE(Hematoxylin Eosin)染色观察形觉剥夺性弱视组和正常组大鼠视皮层神经元细胞的形态;然后采用sp免疫组化法检测形觉剥夺性弱视组和正常组大鼠视皮层4个时间点gsk-3β、crmp-2免疫阳性神经元的表达,并使用图像分析系统测定gsk-3β、crmp-2免疫阳性神经元表达的平均光密度值(aod值)并进行统计学分析。结果:1.p-vep检测:与正常组相比,形觉剥夺性弱视组大鼠p100波的潜伏期明显延长(p<0.05),振幅明显降低(p<0.05),提示单侧眼睑缝合7天后,可成功建立单眼形觉剥夺性弱视大鼠模型。2.he染色:正常组大鼠视皮层神经元细胞轮廓清晰,可清楚显示各神经元细胞的形态,细胞分布较密集,形觉剥夺性弱视组大鼠视皮层神经元分布稀松,且排列紊乱,无法清晰辨别细胞形态,胞体变小,核固缩,呈嗜碱性,部分核溶解。3.免疫组化结果:1)gsk-3β在大鼠视皮层存在表达。正常组大鼠视皮层gsk-3β的表达在14天,21天,45天,120天各时间点之间比较,各时间点之间均无明显差异(p>0.05)。形觉剥夺性弱视组大鼠视皮层gsk-3β的表达在14天,21天,45天,120天各时间点之间比较,除45天与120天比较无差异(p>0.05)外,其余各时间点之间两两比较均有差异(p<0.05)。与正常组大鼠相比,形觉剥夺性弱视大鼠视皮层gsk-3β的表达在14天时无明显差异(p>0.05),但在21天,45天,120天时均升高(p<0.05)。2)crmp-2在大鼠视皮层中存在表达。正常组大鼠视皮层crmp-2的表达在14天,21天,45天,120天各时间点之间比较,除45天与120天比较无差异(p>0.05)外,其余各时间点之间两两比较均有差异(p<0.05)。形觉剥夺性弱视组大鼠视皮层crmp-2的表达在14天,21天,45天,120天各时间点之间比较,除45天和120天(p>0.05)外,其余各时间点之间两两比较均有差异均有统计学意义(p<0.05)。与正常组大鼠相比,形觉剥夺性弱视大鼠视皮层crmp-2的表达在14天时无明显差异(p>0.05),但在21天,45天,120天时均降低(p<0.05)。3)大鼠视皮层gsk-3β和crmp-2表达的相关性:在正常组大鼠视皮层中gsk-3β和crmp-2两者之间无明显相关性(r=-0.142,p>0.05),而在形觉剥夺性弱视组大鼠视皮层中,两者呈负相关性(r=-0.838,p<0.05)。结论:1.在大鼠视觉发育关键期的早期,行单侧眼睑缝合术7天后可以成功建立单眼形觉剥夺性弱视大鼠模型。2.在正常大鼠视觉发育关键期内,gsk-3β和crmp-2在大鼠大脑视皮层均有表达,说明二者有可能参与大鼠视觉发育的过程。3.在形觉剥夺性弱视大鼠视皮层中,gsk-3β的表达随着剥夺时间的延长逐渐升高,45天时达到峰值,而crmp-2的表达随着剥夺时间延长而逐渐下降,45天时达到低值,两者呈负相关性,提示在视觉发育的可塑性期内,gsk-3β和crmp-2可能通过某种调节机制参与弱视的发生发展过程。