目的：通过离体细胞实验研究疏肝理气法对大鼠胃Cajal间质细胞的分化活性影响,并基于Ca2+通道、SCF/c-kit信号转导通路探讨其作用机制。方法：(1)制备含药血清,分成实验组：5%、10%、20%浓度柴胡疏肝散含药血清,条件对照组：10%浓度吗丁啉含药血清,空白组：10%浓度生理盐水含药血清。(2)急性分离、II型胶原酶酶解法提取正常大鼠胃窦Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICC)并采用M199完全培养基进行细胞原代培养,在倒置显微镜下观察。(3)免疫荧光染色法鉴定培养细胞为ICC并通过正置荧光显微镜观察确定,MTT法测定ICC对数生长曲线。(4)通过CCK-8法检测细胞活性(含药血清作用后24h、48h、72h)、Fluo-3荧光检测ICC内Ca2+变化并采用激光共聚焦显微镜观察、Western Blot检测CaM、SCF、c-kit蛋白表达(含药血清作用后72h),进而比较各组含药血清对大鼠胃窦ICC分化活性的影响。结果：ICC在倒置显微镜下形态特征明显,对数生长曲线反映该细胞生长特征,免疫荧光染色及荧光显微镜观察鉴定可见该细胞的特异性膜结合蛋白c-Kit阳性表达显色,提示ICC培养成功。与空白组比较,条件对照组与实验组24h、48h、72h的ICC活性,细胞内Ca2+浓度,10%吗丁啉组CaM、c-Kit蛋白表达,以及10%、20%柴胡疏肝散组CaM、SCF、c-Kit蛋白表达均显著增强(P<0.05)。与10%吗丁啉组比较,10%、20%柴胡疏肝散组24h、48h、72h的ICC活性,细胞内Ca2+浓度与CaM蛋白表达,以及20%柴胡疏肝散组SCF、c-kit蛋白表达均显著增强(P<0.05)。与5%柴胡疏肝散组比较,10%、20%柴胡疏肝散组48h、72h的ICC活性,细胞内Ca2+浓度,以及20%柴胡疏肝散组CaM, SCF、c-Kit蛋白表达均显著增强(P<0.05)。与10%柴胡疏肝散组比较,20%柴胡疏肝散组72h的ICC活性,以及c-Kit蛋白表达显著增强(P<0.05)。结论：疏肝理气法具有促进大鼠胃ICC分化活性的作用,其机制可能与通过Ca2+通道激活Ca2+、CaM,增加ICC细胞内Ca2+浓度、上调CaM蛋白表达,以及通过SCF/c-Kit信号转导通路上调SCF、c-Kit表达有关。