研究背景及目的:目前胶质瘤的治疗存在许多挑战,尤其是高级别的胶质瘤表现出瘤内和瘤间的异质性,这些特性有助于放化疗抵抗并且导致肿瘤复发。相对于这些难题,药物联合治疗已显示出越来越多的优势。利用胶质瘤大规模基因组和蛋白质组分析可以发现潜在的药物靶点。“可用药”的靶标经过验证后可确认为临床候选药物。研究胶质瘤的分子机制并探讨相应的靶向药物,是当今胶质瘤治疗急需解决的问题。上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal,EMT)与肿瘤的发生、恶性进展、以及肿瘤细胞对治疗的抵抗息息相关。最近的研究表明,EMT以一种渐进的方式发生,其特征是细胞会表达不同水平的上皮和间质细胞标记物同时其表观遗传也有差异。EMT的过程是可逆的,经过EMT过程的肿瘤细胞,能够侵入邻近组织,一旦进入血液或淋巴管后可以与非EMT细胞合作,完成肿瘤在远处器官转移和定植。氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)是从分布在亚洲东北部花椒属植物两面针的根中提取到的成分,具有多种生物活性。近年的研究表明NC在多种肿瘤中都有抑制肿瘤细胞增殖和细胞发生EMT的作用,但NC对胶质瘤细胞EMT的抑制作用及其机制目前尚未阐明,也未见有人探讨过。本研究旨在研究NC对人胶质瘤细胞EMT过程的抑制作用及其可能的分子机制。方法:利用TGF-β1诱导人胶质瘤LN18和U87细胞发生EMT改变,应用NC作为EMT的干预药物。通过Western blotting、划痕实验、Transwell侵袭实验、流式细胞术等方法,分析和研究NC对人胶质瘤LN18和U87细胞EMT过程的抑制作用及机制。结果:1.加入NC的胶质瘤细胞存活率下降,表明NC可以抑制胶质瘤细胞的增殖。2.NC可以抑制胶质瘤细胞EMT相关蛋白标志物的表达,表明NC可以抑制胶质瘤细胞发生EMT。3.NC使胶质瘤细胞EMT后的侵袭和迁移能力降低,表明NC可以抑制胶质瘤细胞EMT后增强的迁移与侵袭能力。4.NC可以使胶质瘤细胞凋亡率增加,并增加相关凋亡蛋白的表达,表明NC可以通过促进胶质瘤细胞凋亡抑制胶质瘤细胞生长。5.加入特异性STAT3抑制剂后EMT相关蛋白标志物表达下降,表明NC通过抑制转录因子STAT3抑制胶质瘤EMT的发生。结论:1.NC对胶质瘤LN18和U87细胞增殖有浓度依赖性的抑制作用。2.NC影响胶质瘤LN18和U87细胞的EMT过程。3.NC可以明显降低胶质瘤细胞EMT引起的细胞迁移与侵袭。4.NC具有诱导胶质瘤细胞凋亡的作用。5.STAT3信号通路参与胶质瘤细胞的EMT过程,NC对胶质瘤EMT的抑制作用可能是通过降低STAT3活性实现的。