论文部分内容阅读
目的:E2F1（E2F转录因子1）的作用取决于癌症的类型。在胃癌和霍奇金淋巴瘤中，E2F1作为肿瘤抑制因子，而在小细胞肺癌和透明细胞肾癌中，E2F1作为癌基因。在这里，研究E2F1对卵巢癌发生和进展的作用及其分子机制。 方法:通过免疫组织化学方法检测卵巢癌组织中E2F1的表达水平。E2F1质粒转染和E2F1-microRNA-519d(miR-519d)/si-RhoC（Ras同源基因家族成员C）共转染后，通过MTT实验、细胞周期实验、细胞凋亡实验、Transwell实验和划痕实验检测转染对卵巢癌细胞系A2780和OVCAR3细胞表型的影响。通过裸鼠成瘤模型验证E2F1和miR-519d对卵巢癌发生发展的作用;通过RT-PCR和Western blot检测E2F1和miR-519d对A2780和OVCAR3细胞基因型的影响。通过双荧光素酶报告基因测定以确认E2F1靶向作用于miR-519d，miR-519d靶向作用于RhoC。使用Spearman相关性检验和Mann-Whitney U检验进行统计学分析。 结果:分别与正常卵巢组织和正常输卵管组织相比，E2F1在Ⅰ型和Ⅱ型卵巢癌中的表达均显著上升（P＜0.05）。E2F1过度表达促进细胞增殖(P＜0.05)，促进细胞G1/S进展(P＜0.05)，促进细胞存活(P＜0.05)，促进细胞迁移（P＜0.05）和体外侵袭(P＜0.05);miR-519d或siRhoC共转染逆转E2F1致癌作用(P＜0.05)。E2F1过表达促进体内肿瘤生长，miR-519d过表达抑制体内肿瘤生长。E2F1过表达上调RhoC、Bcl-2、cyclinD1、survivin、MMP2（基质金属蛋白酶2）、MMP9、STAT3（信号转导和转录激活因子3）和HuR（ELAV样RNA结合蛋白1）表达，miR-519d过表达降低这些基因的表达。 结论:我们的研究结果表明E2F1在卵巢癌发生发展中起到促癌作用。E2F1可以靶向作用于miR-519d的启动子，下调miR-519d的表达，miR-519d可以靶向作用于RhoC的mRNA，下调RhoC的表达。同时，miR-519d还可以靶向下调E2F1的mRNA表达，E2F1和miR-519d之间存在靶向抑制调节环路。发现了E2F1促进卵巢癌发生发展的机制，其中E2F1/miR-519d/RhoC信号通路对卵巢癌的诊断和治疗有重要意义。