槲皮素诱导肿瘤细胞程序性坏死的机制研究

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目的:尽管有HPV疫苗和宫颈癌早期筛查,宫颈癌仍然是20岁至39岁女性所有癌症中的主要死亡原因之一。宫颈癌细胞具有通过多种机制获得对常见癌症治疗抗性的趋势,因此需要研究、寻找克服肿瘤抗性潜力的新药物从而避免肿瘤细胞的凋亡抗性。槲皮素(Quercetin,Que)是一种广泛存在于植物中的类黄酮,为常见中草药的主要抗氧化成分。已发现槲皮素能抑制多种类型的癌症,在癌症治疗上具有很高的潜力,但其抗肿瘤作用机制有待进一步研究。本研究旨在探讨Que体外抗肿瘤活性及其诱导人宫颈癌He La细胞死亡的机制。方法:1.槲皮素体外抗肿瘤活性研究MTT实验检测槲皮素抑制肿瘤细胞增殖的作用;采用划痕试验检测人宫颈癌He La细胞增殖迁移能力。2.槲皮素诱导人宫颈癌He La细胞死亡的作用研究比色法检测细胞培养上清中的LDH活性;采用Hoechst 33342/PI双染色法,检测细胞经槲皮素处理后相关的形态变化。3.槲皮素诱导人宫颈癌He La细胞程序性坏死的研究采用Western Blot方法,检测槲皮素诱导He La细胞发生程序性坏死的关键蛋白(RIPK1/RIPK3)表达情况;程序性坏死抑制剂Nec-1对槲皮素抗增殖作用的影响。结果:1.槲皮素对He La(宫颈癌)、7721(肝癌)、A549(肺癌)、Hep G2(肝癌)、231+(乳腺癌)等多种肿瘤细胞系均有抑制增殖作用,尤以对人宫颈癌He La细胞的作用突出。划痕实验表明,与对照组相比,槲皮素明显抑制He La细胞的增殖迁移。2.槲皮素处理后,细胞培养上清液中的LDH活性升高,Hoechst 33342/PI双染色阳性细胞数量增多。3.Western blot检测发现,槲皮素可上调He La细胞程序性坏死相关蛋白RIPK1/RIPK3蛋白的表达。结论:1.槲皮素在体外能抑制人宫颈癌He La细胞增殖。2.槲皮素能诱导人宫颈癌He La程序性坏死,其机制与上调RIPK1、RIPK3蛋白有关。
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