【摘 要】
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异亮氨酸具有调节机体免疫的功能,并可缓解病原微生物（如轮状病毒）诱导的炎症反应。本研究旨在探讨饲粮补充L-异亮氨酸（L-isoleucine,L-Ile）是否能有效缓解葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）攻毒诱导的炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）对大鼠肠道健康和免疫功能的负面影响。本试验选取44只3周龄断奶健康雄性Wista
【基金项目】
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四川省“十三五”农作物及畜禽育种攻关项目（2016NYZ0052）； 四川省农业科技成果转化资金项目（2020NZZJ022）； 四川农业大学“学科建设双支计划”；
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异亮氨酸具有调节机体免疫的功能,并可缓解病原微生物（如轮状病毒）诱导的炎症反应。本研究旨在探讨饲粮补充L-异亮氨酸（L-isoleucine,L-Ile）是否能有效缓解葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）攻毒诱导的炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）对大鼠肠道健康和免疫功能的负面影响。本试验选取44只3周龄断奶健康雄性Wistar大鼠,采用2×2试验设计,试验因子分别为DSS攻毒和饲粮中L-Ile水平。从试验第1 d,对所有大鼠饲喂补充0和1.0%L-Ile的饲粮（n=22）;第15d至试验结束,每个饲粮处理随机选取11只大鼠给予4.0%DSS溶液饮水,剩余大鼠给予正常饮水（n=11）。试验期为35 d。试验结果表明:（1）DSS攻毒前（试验第1～14 d）,饲粮补充1.0%L-Ile显著提高了断奶大鼠的ADG（P＜0.05）,显著降低了其F/G（P＜0.05）,对ADFI无显著影响（P＞0.05）。DSS攻毒后（试验15～35 d）,DSS攻毒显著降低了大鼠ADG和ADFI（P＜0.05）,显著提高了F/G（P＜0.05）,有提高SUN浓度的趋势（P=0.08）;饲粮补充1.0%L-Ile可显著提高断奶大鼠的ADG（P＜0.05）,显著降低其F/G（P＜0.05）,有提高ADFI的趋势（P=0.07）,显著降低了大鼠SUN浓度（P＜0.05）;在DSS攻毒大鼠中,饲粮补充1.0%L-Ile显著缓解了DSS攻毒对ADG、ADFI、F/G和SUN浓度的负面影响（P＜0.05）。（2）DSS攻毒引起大鼠大规模腹泻、便血和体重降低,显著提高了大鼠的DAI指数及脾脏和肝脏的脏器指数（P＜0.05）,显著降低了结肠长度（P＜0.05）,且诱导大鼠结肠黏膜层发生大面积溃疡,肠上皮结构破坏,并伴有淋巴细胞与中性粒细胞浸润,以及大量胶原纤维增生。饲粮补充1.0%L-Ile有效改善了DSS攻毒引起的DAI及脾脏和肝脏脏器指数的升高（P＜0.05）,显著增加了攻毒大鼠的结肠长度（P＜0.05）,使结肠组织浸润的炎性细胞数量减少,溃疡、纤维化病变得到缓解。（3）DSS攻毒显著降低了大鼠结肠ZO-1的m RNA表达量（P＜0.05）,但对MUC2和Claudin-1的m RNA表达量无显著影响;饲粮补充1.0%L-Ile有效缓解了DSS攻毒引起的ZO-1和Claudin-1的m RNA表达量降低（P＜0.05）。（4）DSS攻毒使大鼠结肠组织早期、晚期和总凋亡细胞率显著增加（P＜0.05）;在DSS攻毒大鼠中,饲粮补充1.0%L-Ile显著缓解了DSS攻毒增加的大鼠结肠组织晚期和总凋亡细胞率（P＜0.05）。DSS攻毒显著提高了大鼠结肠组织细胞周期中G0/G1期细胞数量（P＜0.05）,显著减少了S期细胞数量（P＜0.05）,对G2+M期细胞数量无显著影响（P＞0.05）;饲粮补充1.0%L-Ile显著降低了大鼠结肠组织细胞周期中G0/G1期细胞数量（P＜0.05）,显著增加了S期细胞数量（P＜0.05）,对G2+M期细胞数量无显著影响（P＞0.05）;在DSS攻毒大鼠中,饲粮补充1.0%L-Ile对各期细胞数量无显著影响（P＞0.05）。（5）DSS攻毒显著提高了大鼠结肠组织中MDA含量（P＜0.05）,对GSH-Px活性和T-AOC无显著影响（P＞0.05）。饲粮补充1.0%L-Ile对MDA含量、GSH-Px活性和T-AOC无显著影响（P＞0.05）。（6）DSS攻毒显著提高了大鼠结肠组织中MPO活性（P＜0.05）,显著增加了结肠组织中CD11c、CD64和CD169的阳性细胞率（P＜0.05）;饲粮补充1.0%L-Ile可显著缓解DSS攻毒诱导的大鼠结肠组织中MPO活性及CD11c、CD64和CD169的阳性细胞率的提高（P＜0.05）。（7）DSS攻毒显著提高了大鼠结肠组织中炎症因子IL-1β、IL-6和IL-17含量（P＜0.05）,显著降低了IL-4和IL-35含量（P＜0.05）,并显著上调了TLR-4、My D88和NF-κB的m RNA表达量（P＜0.05）。饲粮补充1.0%L-Ile可显著降低DSS攻毒大鼠结肠组织中IL-1β、IL-6和IL-17含量（P＜0.05）,显著提高了IL-4和IL-35含量（P＜0.05）,缓解了TLR-4、My D88和NF-κB的m RNA表达量上调。综上所述,DSS攻毒使大鼠结肠发生明显的损伤,上皮细胞被破坏,屏障功能受损,产生明显的炎症反应,进而导致大鼠生长性能下降。饲粮补充1.0%L-Ile可以缓解DSS攻毒诱导的大鼠结肠损伤、屏障功能受损和生长性能下降,这可能源于Ile可通过下调TLR4/My D88/NF-κB信号传导通路缓解炎症反应有关。
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