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人类eag相关基因(Human ether-a-go-go related gene1,HERG1)钾离子通道蛋白表达于多种组织来源的肿瘤中,由于其与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭等一系列生物学活性相关而越来越受到重视。我实验室前期研究发现HERG1基因在不同恶性程度的骨肿瘤组织有表达,且表达水平与肿瘤恶性程度有关。前期的研究同时显示在骨肉瘤细胞系中HERG1mRNA表达水平增加。本研究试图阐明HERG1在骨肉瘤细胞中的表达及其与骨肉瘤细胞生物学行为的关系。目的:本研究旨在探讨HERG1在骨肉瘤细胞系SOSP-9607和MG-63中的表达情况,并通过抑制HERG1的表达研究其对骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:(1)采用免疫细胞化学、免疫荧光和Western blot的方法研究HERG1在骨肉瘤细胞系SOSP-9607和MG-63中的表达情况;(2)构建针对HERG1的shRNA稳定表达载体,并转染骨肉瘤细胞系,建立稳定抑制HERG1表达的骨肉瘤细胞系;(3)运用CCK-8检测抑制HERG1表达对骨肉瘤细胞增殖能力的影响;(4)运用Transwell检测抑制HERG1表达对骨肉瘤细胞侵袭能力的影响。结果:(1)免疫细胞化学、免疫荧光和Western blot结果显示HERG1在两株骨肉瘤细胞中呈阳性表达;(2)成功构建针对HERG1的shRNA真核表达载体;(3)成功建立稳定表达HERG1-shRNA的细胞系,并筛选出抑制HERG1表达最高的细胞株;(4)CCK-8检测结果显示:抑制HERG1表达后两株骨肉瘤细胞系增殖能力减弱;(5)Transwell检测结果显示:抑制HERG1表达后两株骨肉瘤细胞系侵袭能力减弱。结论:在骨肉瘤细胞系SOSP-9607和MG-63中,HERG1在蛋白水平阳性表达,通过RNAi方法抑制HERG1在两株骨肉瘤细胞中的表达后,骨肉瘤细胞的增殖和侵袭能力明显减弱。HERG1钾离子通道与骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力存在密切关系。