细胞色素C、橙皮素与鲁米诺的发光行为研究

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本学位论文为鲁米诺化学发光体系在生物、药物分析方面的研究,共分为两个部分:第一部分综述本部分以化学发光分析相关的近两百篇文献为基础,总结了不同的化学发光体系在生物、药物分析中的应用。第二部分研究报告鲁米诺以其良好的发光性能及广泛的适用性成为至今研究最为深入的一类化学发光试剂。本研究工作主要以鲁米诺为发光试剂,过氧化氢和溶解氧为氧化剂,采用流动注射技术,设计了化学发光实验装置,建立了数种灵敏、简单、迅速的新分析方法:(1)细胞色素C是位于线粒体内膜上的一种小分子血红素蛋白,在生物呼吸链中扮演重要角色,并能诱导细胞死亡。研究发现,细胞色素C能够显著增大鲁米诺-过氧化氢化学发光体系的发光强度,据此建立了一种测定细胞色素C的新方法,检测线性范围为5~700 ng mL-1,检出限为2 ng mL-1(3σ)。本研究工作已发表在SCI源期刊Applied Biochemistry and Biotechnology,2010, V160(4):1065-1073.(2)橙皮素是柑桔属植物中普遍存在的一种类黄酮物质,具有抗氧化、抗炎症、降血脂、保护心血管和抗肿瘤的药效作用。研究发现橙皮素能强烈抑制鲁米诺-溶解氧产生的化学发光信号,并且化学发光强度的减少值与橙皮素浓度的对数呈现线性相关,基于这一现象建立了测定橙皮素的化学发光方法,线性范围为0.5~1000 ng mL-1,检出限为0.2 ng mL-1(3σ)。该方法已被成功的应用于人体尿液中橙皮素的监测。(3)苯巴比妥,是长效巴比妥类的典型代表。本文基于苯巴比妥对鲁米诺-溶解氧体系化学发光反应的增敏作用,建立了流动注射-化学发光法测定苯巴比妥的新方法。该体系化学发光强度的增加值与苯巴比妥的浓度在0.05~10 ng mL-1的范围内具有良好的线性关系,检测限为0.02 ng mL-1(3σ)。该方法成功的应用于血清、尿样中苯巴比妥含量的测定,对于样品测定的回收率为93.9%-115.9%。本研究工作已发表在Biochemistry (Moscow) Supplement Series B:Biomedical Chemistry,2010, In press。
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